牙龈间充质干细胞促进骨质疏松大鼠种植体骨结合的研究

来源 :山东大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bodao
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探讨系统应用牙龈间充质干细胞对骨质疏松大鼠种植体骨结合的影响,为促进种植体的骨结合提供一条崭新的思路。方法:1、酶解法培养GFP+C57/BL转基因小鼠牙龈间充质干细胞(gingiva-derived mesenchymal stem cells, GMSCs),流式检测细胞表面标记物,同时进行成骨诱导及上皮样细胞诱导。2、去势法建立骨质疏松模型:3月龄纯种wistar雌性正常大鼠为对照组,摘除双侧卵巢的3月龄纯种wistar雌性大鼠为实验组。术后3个月处死各组大鼠,通过测定血清碱性磷酸酶及组织HE染色鉴定模型是否成功建立。3、取63只3月龄纯种wistar雌性大鼠随机分为3组:A组(正常+PBS)(n=21):种植术前30分钟尾静脉注入PBS; B组(去势+PBS) (n=21):去势术后3个月,种植术前30分钟尾静脉注入PBS; C组(去势+GMSCs) (n=21):去势术后3个月,种植术前30分钟尾静脉注入GMSCs悬液。4、各组大鼠均全麻下于双侧股骨远心端植入种植体,种植术后1周、4周、8周各组分别处死6只大鼠,采用荧光定量PCR (relative fluorescence quantitative polymerase chain-reaction, RT-PCR)检测种植体周围骨组织成骨相关基因及炎症因子的表达;采用硬组织切片亚甲基蓝-酸性品红染色检测种植骨结合率;于4周各组另处死3只大鼠通过免疫组化及DAPI染色检测GFP+GMSCs归巢。结果:1、成功培养C57/BL小鼠GMSCs,为长梭形,典型成纤维细胞形态,GFP表达阳性且稳定。流式细胞术榆测结果:GMSCs表达CD29 (99.9%)、CD44 (92.6%),不表达CD34 (5.1%)、CD31 (4%)、CD45 (0.8%)、CDllb (1.5%)。成骨诱导液诱导28天后镜下可见钙化结节,茜素红染色后结节呈红褐色;上皮样细胞诱导液诱导14天后可见细胞形态明显改变,似铺路石样。2、成功建立wistar大鼠骨质疏松模型,实验组大鼠血清中碱性磷酸酶活性明显高于对照组,两组差异具有统计学意义(P<0.05)。HE染色表明:实验组与对照组相比股骨骨小梁数目减少,部分骨小梁变细断裂,不连续,骨髓腔变大。3、检测种植体周围组织成骨相关基因及炎性因子表达术后1周:A组、C组与B组相比,BSP表达上调,差异均有统计学意义(P<0.05); OPN表达上调, A、B两组间差异有统计学意义(P<0.05),B、C两组间差异无统计学意义(P>0.05);IL-1表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后4周:A组、C组与B组相比,BSP、OPN表达上调,IL-1表达下调,且差异均有统计学意义(P<0.05)。术后8周:A组、C组与B组相比,BSP表达略上调,差异均无统计学意义(P>0.05); OPN表达上调,IL-1表达下调,且均有统计学意义(P<0.05)。4、1周、4周、8周硬组织切片结果显示A组、C组种植体骨结合率高于B组,1周时B组和C组间差异无统计学意义(P>0.05),其余均有统计学意义(P<0.05)。5、4周组织石蜡切片免疫组化及DAPI染色后,种植体周围组织可见GFP+细胞归巢。结论:1、酶解法分离培养GFP+牙龈间充质干细胞操作简便,传代2-3次后细胞纯度较高,GFP表达稳定。牙龈间充质干细胞有成骨向分化及成上皮样细胞分化的潜能。2、通过去势法可成功建立骨质疏松模型。3、系统应用GMSCs,可在种植体周围新生组织中检测到GFP+GMSCs的归巢,并部分分化为成骨细胞参与新生骨的形成,促进种植体的骨结合。
其他文献
目的:探讨颞下颌关节紊乱病(TMD)在新疆青年人中的患病情况。方法:对新疆医科大学在读维汉医学生812人年龄17~28岁进行了患病状况及咬合情况调查。按照Helkimo指数进行分析,包
目的 对比老年股骨粗隆间骨折患者采用动力髋钉、锁定钢板治疗方案的临床价值.方法 研究样本为本院2018年1月至2020年1月收录的60例老年股骨粗隆间骨折患者,依据治疗方案将患
目的 探讨氨氯地平联合阿托伐他汀在高血压合并高血脂患者中的治疗效果及不良反应.方法 选择2018年7月至2019年12月在本院就诊治疗的高血压合并高血脂患者122例,按照随机双盲
以数字化、网络化为代表的现代传播技术的发展,使世界进入了新媒体时代。随着各种新媒体的强势崛起,广播这一仅以声音为传播载体的传媒再次遇到极大的挑战。如何在新的传播生
目的 探究生化检验于糖尿病诊断应用价值.方法 研究纳入对象均为本院内科收治的糖尿病患者,共计90例,病历资料纳入起止时间为2018年5月至2020年4月,采用红白双色抓阄方式均分
“为什么类似这样的事件总是会屡屡发生?除了监管部门担负着不可推卸的责任外,还应该加大国家法律法规的处罚力度,食品安全问题如此多发,只能重点治乱象。”这是《中国工业报
目的 探讨品管圈活动在提高消化内科患者外出辅助检查知晓率中的应用效果.方法 按照品管圈活动程序对消化内科患者进行外出辅助检查的管理,确定辅助检查知晓率低的改善重点是
目的 分析探讨不同体位固定技术在胸腹部肿瘤放射治疗中的应用效果.方法 按照本次研究的样本纳入标准,从2018年7月至2019年7月在本院接受放射治疗的胸腹部肿瘤患者中,筛选出1
建筑工程中的基础施工环节往往会对整体工程质量和耐久性产生一定影响,在实际施工中,为了保障工程质量,对基础施工环节给予了足够的关注.但从前期的工程建设状况来看,基础施