论文部分内容阅读
精子顶体反应(acrosome reaction,AR)是动物受精的前提,研究精子顶体反应及其内在机制对动物遗传育种与繁殖的理论和实践具有重要意义。本研究以马鹿(Cervus elaphus)为试验对象,对钙离子载体A23187(calcium ionophore A23187,A23187)与钾离子载体缬氨霉素(valinomycin,Val)诱发马鹿精子顶体反应及对离子转运的影响进行了研究。采用上浮法使精子获能,用A23187和Val诱发精子顶体反应,以顶体反应率作为主要指标,以精子活力或精子活率为辅助指标,研究两种因子对精子顶体反应的影响:使用电感耦合等离子体发射光谱仪(inductive coupled plasma,ICP)检测顶体反应前、后不同时间培养液中Ca2+、Mg2+、K+、Na+、总P浓度变化,使用离子色谱仪检测Cl-浓度变化,依次分析A23187和Val对顶体反应前后离子转运的调节作用。试验结果表明: 1、浓度不超过0.5%的DMSO在2h内对马鹿精子活力没有影响,浓度超过0.5%的DMSO可使马鹿精子活力下降。 2、0.01μmol/L~100μmol/L的A23187可提高获能马鹿精子的顶体反应率;其中适宜的A23187浓度为0.1μmol/L,顶体反应率为74.00±2.62%;而且0.1μmol/L A23187诱导马鹿精子顶体反应的时间以5min为宜。 3、0.01μmol/L~50μmol/L的Val可提高获能马鹿精子的顶体反应率:其中适宜的Val浓度为0.5μmol/L,顶体反应率为74.48±0.90%;0.5μmol/L Val诱导马鹿精子顶体反应在15min内对顶体反应率没有明显影响(P>0.05)。 4、A23187与Val协同诱导获能马鹿精子发生顶体反应的较适宜浓度组合为0.5μmol/L A23187+10μmol/L Val或5μmol/L A23187+10μmol/L Val。 5、单独使用A23187或Val、以及A23187与Val共同作用对未获能马鹿精子顶体反应作用不明显(P>0.05),而且对马鹿精子获能作用也不明显(P>0.05)。 6、A23187或Val诱导马鹿精子顶体反应的10min内,培养液中Ca2+、Mg2+、K+、Na+、总P和Cl-等浓度发生的变化,反映了其对顶体反应过程中离子转运的调节。