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目的：结直肠癌是人类常见的恶性肿瘤之一，据全球癌症统计，其死亡率在恶性肿瘤中排第四位。在我国，结直肠癌的发病率和死亡率呈逐年增高趋势。转移是恶性肿瘤致死的主要原因。结直肠癌是一类上皮来源的恶性肿瘤。越来越多的研究显示，上皮-间质转化（epithelial-mesenchymaltransition，EMT）是上皮来源肿瘤转移的首要步骤。微小RNA是一类近十年来备受关注的广泛存在于真核生物及病毒中的非编码小分子RNA，其大小约22个核苷酸。成熟的微小RNA通过与靶mRNA的3’端非编码区完全或不完全互补结合，在转录后水平调控基因的表达，调控细胞的多种生物学行为，与肿瘤的发生发展密切相关。而miR-200家族是一类重要的上皮-间质转化（EMT）调控因子，TGF-β1和ZEB1/2是其重要的靶基因。临床上发现，晚期结直肠癌患者往往合并血小板增多症。早期研究发现，血小板也能促进肿瘤转移。最新研究显示，血小板通过TGF-β1途径参与了EMT的发生。众所周知，血小板α颗粒富含TGF-β1，而PAR1是人血小板表面的一种蛋白酶活化受体，血小板PAR1激活后α颗粒可能释放大量细胞因子（如TGF-β1）影响肿瘤血管生成和转移。血小板和miR-200家族均可通过TGF-β1途径影响肿瘤的转移。而它们两者在调控肿瘤转移过程中是否存在关联在国内外罕有报道。本实验采用荧光实时定量PCR、MTT、ELISA等方法探讨血小板蛋白酶活化受体-1以PAR1激动剂（TFLLR-NH2）激活后对SW620细胞miR-200b表达水平的影响，旨在为结直肠癌治疗提供新的依据。方法：1以不同浓度（1μM、3μM、5μM、7μM、9μM、30μM）的PAR1激动剂（TFLLR-NH2）处理SW620，同时设定空白对照组（单纯加细胞培养液），在温箱中孵育24h后，采用MTT法检测各组细胞，比较各组细胞增殖功能的变化。2应用ELISA法对不同浓度（1μM、3μM、5μM、7μM、9μM）PAR1激动剂（TFLLR-NH2）激活的血小板上清的TGF-β1进行定量分析。3以3μM浓度的PAR1激动剂（TFLLR-NH2）激活人血小板后，提取血小板上清，设定4个处理组，分别取不同体积量（60μl、120μl、240μl、480μl）的血小板上清处理6孔板中的SW620细胞，同时设定空白对照组及单纯激动剂组，空白对照组单纯加细胞培养液，单纯激动剂组加入0.72μM PAR1激动剂，在温箱中分别孵育24h及48h后，利用TRIZOL法提取总RNA，反转录合成cDNA，采用基于2(-△△Ct)的实时荧光定量RT-PCR法对各组miR-200b的表达水平进行定量分析。结果：1MTT结果显示，小剂量各个不同浓度（1μM、3μM、5μM、7μM、9μM）PAR1激动剂处理组和对照组在492nm下测得的OD值分别为0.321±0.015、0.314±0.024、0.308±0.015、0.321±0.027、0.313±0.012、0.302±0.024、各组间差异无统计学意义（P>0.05）；大剂量浓度（30μM）PAR1激动剂处理组所测得的OD值为0.203±0.008，较对照组相比降低了32.9%（P<0.01）。2ELISA实验结果显示，对照组及各个不同浓度（1μM,3μM，5μM，7μM,9μM）PAR1激动剂处理组在450nm下测得代表TGF-β1含量的OD值分别为0.084±0.003、0.121±0.007、0.322±0.010、0.496±0.010、0.508±0.005、0.516±0.003。各个处理组TGF-β1含量较对照组均升高，其差异均有统计学意义（P<0.01）；7μM与9μM处理组差异无统计学意义（P>0.05）。3血小板上清处理SW620细胞24h后，空白对照组和单纯激动剂组SW620细胞miR-200b的相对表达量2-△△CT值分别为0.117±0.007、0.113±0.002；而48h后,这两组的值分别为0.052±0.001、0.046±0.005。两组间差异均无统计学意义（P>0.05）。4血小板上清处理SW620细胞24h后，各个处理组（60μl、120μl，240μl、480μl）及对照组SW620细胞miR-200b的相对表达量2-△△CT值分别为0.118±0.013、0.105±0.006、0.095±0.001、0.080±0.013、0.117±0.007。血小板PAR-1激活后的血小板上清60μl、120μl处理组与空白对照组差异无统计学意义（P>0.05），而血小板上清量为240μl，480μl处理组中miR-200b的表达水平较空白对照组均降低（P<0.05），并且随着血小板上清量的增加，SW620细胞miR-200b的表达水平呈下降趋势。而血小板上清处理SW620细胞48h后，所有组间差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：1小剂量浓度（1μM、3μM、5μM、7μM、9μM）的PAR1激动剂不影响人结肠癌细胞SW620的增殖；而大剂量浓度（30μM）的PAR1激动剂抑制了人结肠癌细胞SW620的增殖。2血小板PAR1激活后，血小板α颗粒可释放TGF-β1；随着PAR1激动剂浓度（在0μM-7μM范围内）的升高，血小板释放的TGF-β1呈上升趋势。3血小板PAR1激活后，下调SW620细胞miR-200b的表达，且其作用强度与浓度呈正相关。