冠心病致心功能不全患者血清蛋白质指纹图谱的初步研究

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目的分析冠心病导致心功能不全(Cardiac dysfunction,CD)患者的血清蛋白质指纹图谱,寻找不同心功能级别的CD患者血清中表达差异的标志物,为临床心功能不全早期诊断和心功能分级提供灵敏的实验室指标。方法应用美国Ciphergen PBSⅡ表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption/ionizationtime of flight mass spectrometry, SELDI-TOF-MS)仪和CM10蛋白芯片作为蛋白组学研究平台,检测54例冠心病引起CD患者(心功能Ⅱ级13例、Ⅲ级13例、Ⅳ级28例)和18例疾病对照组(心功能Ⅰ级冠心病患者)血清蛋白质质谱,采用BMW(Biomarker Wizard)软件和BPS5.0(Biomarker patterns systems)软件分析差异蛋白峰,建立诊断模型,并以此模型进行盲法验证。结果在分子量1000-100000Da范围内,冠心病引起CD患者和对照组血清中检测到68个差异蛋白质峰(p<0.05)。其中M/Z为2673Da、3151Da、15343Da、2733Da、2798Da、3932Da、4091Da、4298Da、5638Da等9个显著差异蛋白P<0.001,前3个在CD患者血清中高表达,后6个低表达。经BMW软件分析发现:随着NYHA心功能分级的增加,3279Da蛋白峰先降低后增高,2733Da、4091Da蛋白峰呈递减的趋势。经BPS软件分析筛选出M/Z为2733 Da,3279 Da的2个蛋白峰组成蛋白质质谱分类决策树,区分三组心功能级别的阳性预测值、敏感度、特异度均>90%,而且能将心功能Ⅰ和Ⅳ级标本全部正确诊断。此模型盲法检测另外27例CD患者(Ⅱ级6例、Ⅲ级7例、Ⅳ级14例)和9例疾病对照组(心功能Ⅰ级),阳性预测值、灵敏度和特异度均>80%。结论SELDI-TOF-MS结合蛋白质芯片技术能够快速、有效地筛选出CD患者血清中特异表达标志物。用M/Z为2733 Da、3279 Da的差异蛋白组成诊断模型的敏感度和特异度高,可用于鉴别CD患者的心功能级别。
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