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纳米药物载体以其独特的尺寸、结构及所发挥的优良性能,可改善传统药物的缺点,在药物的靶向递送方面拥有广阔的前景。本文以微生物发酵法制得的K5多糖为大分子模板,设计并构建一系列具有pH响应性的纳米药物载体,用于疏水性抗肿瘤药物的传递研究。具体内容包括以下几个方面:(1)pH响应型KH缀合物的制备及其抗癌研究用组氨酸(Histidine,His)对K5多糖进行修饰,获得K5-His(KH)缀合物,其可在生理环境下自组装形成纳米粒子(KH NPs)并包载模型抗肿瘤药物阿霉素(Doxorubicin,DOX)。运用1H NMR确认了KH结构,计算得出His在KH1、KH2和KH3上的取代度分别为为20%、28%和39%。所制备得到的载药纳米粒子(KHD)在水溶液中分散均匀,粒径均一,其中KH3具有最佳的稳定性及药物包载能力。KH3的临界聚集浓度分别为23 mg/L,载药前后平均水合粒径为275.9 nm和207.7 nm。药物释放结果显示,KHD3表现出明显的pH响应性。细胞实验结果证实KHD3能够有效传递药物进入肿瘤细胞,并在酸性环境下表现出快速药物释放行为。这种载体不仅具有良好的生物相容性,还可显著提高化疗药物的治疗选择性,有望在临床治疗中获得应用。(2)pH响应型K5多糖-金纳米团簇的构建及其抗癌研究在上述研究的基础上,进一步引入?-环糊精(?-cyclodextrin,?-CD)修饰的金纳米粒子(CA),实现提高体系稳定性及增强体系可控性的效果。KH和CA可以通过主客体作用形成具有pH响应性的KH/CA纳米团簇(KA NCs)并可包载DOX。首先通过红外和热重分析确认了CA的结构和取代度,计算得到CD在CA中的质量分数分别为48%、56%和64%,分别命名为CA1、CA2和CA3。随着KH/CA中CD与His摩尔比的增加,粒径逐渐减小并趋于稳定,其中KH3/CA的粒径和PDI最为合适,选择His:CD摩尔比为1:1和2:1的KH3/CA NCs,并对DOX进行包载和传递研究。在低于KH3临界聚集浓度下,KAD NCs仍具有较窄的粒径分布,说明与KHD3 NPs相比,KAD NCs稳定性大幅度提高。通过细胞毒性和细胞摄取研究可以看出,KAD NCs可以快速进入细胞,且KAD4 NCs表现出与DOX相当的肿瘤细胞抑制效果。由于引入粒径可控的金纳米粒子,可提高体系的可控性,增强体系的功能性,在光热治疗及诊断方面具有应用的潜力。综上所述,本研究制备的KAD NCs表现出优于KHD NPs的良好稳定性,具备pH响应性和肿瘤细胞选择性等优越性能,是一种在癌症治疗方向拥有潜在应用前景的药物载体。