环状RNA hsacirc0011940在抗结核药物性肝损伤患者外周血中的表达及功能研究

来源 :华北理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aegon2010
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 筛选并验证抗结核药物性肝损伤(anti-tuberculosis drug-induced liver injury,ADLI)患者血浆中差异表达的环状RNA(circular RNA,circRNA),并从细胞学实验中进一步探讨circRNA作为微小RNA(micro RNA,miRNA)海绵在ADLI中的作用机制。方法 从人群和细胞两方面进行研究。1人群研究:收集唐山市第四医院诊断为肺结核的住院病人的血标本和临床资料,根据严格的纳入排除标准选择肝损伤组与非肝损伤组患者各16例,采用芯片技术筛选出两组中差异表达circRNA并预测circRNA的靶miRNA;再选择肝损伤组与非肝损伤组患者各150例,采用qRT-PCR法验证circRNA、miRNA的差异表达,ELISA法检测两组炎症因子(NF-κB、TNF-α、IL-6)的表达水平;t检验或χ2检验分析患者基本资料、hascirc<sub>0011940及miR-21表达量、ALT、AST、NF-κB、TNF-α和IL-6蛋白水平变化是否有统计学意义;Pearson相关分析判断has<sub>circ<sub>0011940与肝功指标(ALT、AST)、miR-21、炎症因子(NF-κB、TNF-α、IL-6)的相关性。2细胞学实验:以最佳三药联合浓度构建肝损伤细胞模型,通过全基因合成法构建重组过表达质粒,将细胞分为六组:空白组、药物组、circRNA过表达组、过表达对照组、circRNA敲减组、敲减对照组,HE染色观察各组细胞形态学变化;赖氏法检测各组ALT、AST含量变化;qRT-PCR法检测hascirc0011940及F-1κB、TNF-α、IL-6基因的mRNA表达变化;Western Blot法检测各组NF-κB蛋白表达水平;ELISA法检测各组炎症因子TNF-α、IL-6表达水平。为了反向验证circRNA是否作为miRNA海绵来调控ADLI中的炎症反应,进一步将细胞分为空白组、药物组、miR-21过表达组、过表达对照组、miR-21敲减组、敲减对照组六组,检测各组细胞各项指标的变化。结果 1人群研究:在ADLI患者外周血利用circRNA芯片共筛选出6661个差异表达的circRNA,其中表达下调的有6389个,表达上调的有272个;所选目标环状hascirc-0011940在ADLI患者血浆中表达下调(P<0.05),其作为RNA海绵结合miR-21的能力减弱致使ADLI患者外周血中miR-21表达水平升高,与预测结果一致;并且ADLI患者外周血中炎症调节因子NF-κB及炎症因子TNF-α、IL-6表达水平也升高(均P<0.05);has-circ-0011940与肝功指标(ALT、AST)、miR-21、炎症因子(NF-κB、IL-6、TNF-α)呈负相关(r 分别为-0.674、-0.545、-0.309、-0.779、-0.684、-0.492,均P<0.05)。2细胞研究:与空白对照组比,药物组细胞形态改变,数量减少,ALT、AST含量增加,hascirc0011940表达降低,炎症因子NF-κB、TNF-α、IL-6的mRNA及蛋白水平均升高(均P<0.05);过表达hascirc0011940可降低炎症因子NF-κB、TNF-α、IL-6的mRNA及蛋白水平(均P<0.05);而敲减hascirc0011940则加重抗结核药物致肝细胞损伤进程中的炎症反应(P<0.05)。反向验证实验各组中,药物组细胞miR-21表达高于空白组;敲减miR-21可减轻抗结核药物致肝细胞损伤进程中的炎症反应;而过表达miR-21则加重抗结核药物致肝细胞损伤进程中的炎症反应(均P<0.05)。结论 1抗结核药物性肝损伤进程中hascirc0011940表达水平降低,并与肝功指标(ALT、AST)、miR-21、炎症因子(NF-κB、IL-6、TNF-α)呈负相关。2 Hascirc0011940作为miR-21海绵来抑制NF-κB炎症信号通路从而降低抗结核药物性肝损伤进程中的炎症反应。图15幅;表15个;参161篇。
其他文献
啤酒已成为都市消费的新热点,人们饮用啤酒已成为一种习惯。因此,啤酒的质量和安全性问题勿庸置疑地成为消费者和啤酒生产企业所关注的焦点问题。本文基于对啤酒生产工艺和发
今年 ,为贯彻落实江总书记关于“走出去”发展战略的讲话精神 ,我们对上海近年企业海外投资的情况作了较为广泛的调研。一、上海企业海外投资的现状早在80年代中期 ,上海就提出
为了加强对新疆暴雨过程的中尺度系统发展机理的认识,利用美国环境预测中心的FNL、欧洲中期数值预报中心的全球再分析资料、中国气象局提供的地面自动气象站观测资料、中国国
【正】 1987年是元大都城开始兴建的720周年,而今天的北京城正是在元大都城的城址上继续修建和发展起来的。当时在北京史研究会和北京市社会科学院诸同志的倡议下,曾举行了元
总结了看图写话的指导方法。一是看:整体感知,对画面有粗略的了解,注意细节,捕捉信息。二是想:大胆想象,推此及彼画面的内涵,观察细节,启迪思维。三是说:积极引导,对内容进行
山东菏泽洋玫瑰花中氨基酸及微量元素的含量测定张素芹彭广芳王小梅刘青陈苹山东省中医药研究所250014关键词洋玫瑰花氨基酸微量元素含量中国图书资料分类法分类号R284.2洋玫瑰(ROSAchinensiscv.)为蔷薇科植
目的探讨分析合并院前心脏骤停急性心肌梗死运用急诊介入治疗的临床疗效。方法在本院合并院前心脏骤停急性心肌梗死患者中选取100例,随机分为观察组和对照组,每组50例,观察组
<正>美洲兜兰又名南美兜兰、南美拖鞋兰、芦唇兰、马褂兰、女士拖鞋兰,因产于南美洲而花的子房为3室,且唇呈拖鞋状而得名。花型独特,具袋状的唇瓣和艳丽巨大的花瓣,颇受兰花
本文将利用求解最短路径问题的Floyd算法和多元统计分析中的主成分分析方法,对大学城综合商业区的选址问题进行研究.
谐音双关是汉语修辞辞格的一种,汉语中运用颇多。它能使诗文显得含蓄却不失内蕴幽默。本文从三个方面来分析谐音双关手法,同时结合了与大量的经典例子,最后阐述了谐音双关的