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猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起猪的一种高度接触性、致死性传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列入OIE疾病名录(OIE listed diseases)。免疫接种是防制猪瘟的主要措施。目前,我国主要通过接种猪瘟兔化弱毒疫苗来控制猪瘟,该疫苗具有良好的免疫效力,但很难通过血清学方法将CSFV野毒感染猪和疫苗接种猪进行区分。因此,研制安全有效且能利用血清学方法对免疫猪和感染猪进行区分的新型猪瘟疫苗具有重要意义。能转导哺乳动物细胞的重组杆状病毒通常被称作“BacMam病毒”,其中含有在哺乳动物细胞中具有活性的基因表达盒。BacMam病毒作为哺乳动物细胞的基因转移载体被广泛应用于基因治疗和研制开发新型非复制型载体疫苗。作为一种新型疫苗载体,BacMam病毒具有很多独特的优点,因此,BacMam病毒特别适于研制非复制型载体疫苗。我们在之前的研究中利用Bac-to-Bac表达系统构建了含有对虾白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)ie1启动子控制下的EGFP报告基因表达盒的重组杆状病毒BacMam/ie1-EGFP,证实报告基因在昆虫细胞及哺乳动物细胞中均能高效表达。为了进一步验证这一新型哺乳动物细胞转移载体能否用于猪瘟疫苗的研制,本研究将水泡性口炎病毒G蛋白(VSV-G)基因插入多角体启动子下游,得到经修饰的杆状病毒转移载体,将含有WSSV ie1启动子控制下的猪瘟病毒E2基因表达盒插入此载体中,构建了BacMam病毒BacMam/G-ie1-E2,以其感染Sf9细胞和转导HeLa细胞,通过间接免疫荧光试验和Western blot检测E2的表达。同时用BacMam病毒直接免疫小鼠,用针对CSFV E2蛋白的间接ELISA检测免疫小鼠抗体水平,用病毒中和试验检测血清中和抗体滴度,并用基于CSFE和WST-8的淋巴细胞增殖试验评价其细胞免疫应答。结果显示,BacMam/G-ie1-E2能同时在昆虫细胞和哺乳动物细胞中高效表达E2蛋白,免疫小鼠能诱导产生针对猪瘟病毒的特异性中和抗体,免疫小鼠脾细胞经CSFV刺激后能诱导特异性的淋巴细胞增殖。这表明,由BacMam病毒介导的基因转移有望用于开发针对猪瘟病毒的非复制型载体疫苗。