论文部分内容阅读
骨质疏松症（Osteoporosis,OP）是一种以骨量（Bone mineral content,BMC）减少、骨密度（Bone mineral density,BMD）降低、骨纤维结构发生改变致骨折危险性升高的骨骼疾病。近年来OP发病率持续上升,检出率升高,公众对骨健康的重视也使得维持骨健康功能食品消费呈上升趋势。本研究中,我们首先调查了绝经后女性OP的患病及功能食品食用现状,初步了解目前已获得生产许可的保健食品对其骨骼的影响,然后,我们进行了维持骨健康功能食品系统评价方法的探索。第一部分目的采用双能 X 线骨密度检测法（Dual Energy X-ray Absorption Method,DXA）检测303例50～70岁自然绝经女性BMD,调查其相关功能食品食用状况,初步了解目前已获得生产许可的骨健康功能食品对绝经后女性骨骼的影响,探究功能食品评价方法研究的必要性。方法以济南市两所三级甲等医院为中心,调查符合纳入标准的303例志愿者,行腰椎和髋关节BMD测定,并调查其功能食品食用状况。结果绝经后女性OP检出率随年龄增加而升高,低骨量和OP患者检出率分别为53.47%和23.10%;当骨质处于正常或低骨量阶段,腰椎BMD始终高于髋关节;但随着疾病发展至OP状态时,腰椎骨量丢失,两部位BMD差距变小;44.88%的调查对象有近期补钙产品服用史,但组间BMD和T-值比较未见差异。结论本研究绝经后女性低骨量患者和OP患者检出率分别为53.47%和23.10%,检出率较高,对比骨健康功能食品食用与否并未发现其BMD和T-值有组间差异,说明当前已获得生产许可的骨健康功能食品在一定程度上对所调查绝经后女性BMD并未起到良好的改善作用。第二部分目的在查阅国内外BMD研究新方法、新进展基础上,提出对维持骨健康功能食品检验方法的修订建议,并通过实验进行评价和确认,为现行技术规范完善提供依据。方法1.采用成年雌性大鼠制作去势大鼠骨钙缺乏模型,模拟绝经后女性骨钙流失;并选择已上市具有增加BMD功能（含植物雌激素）的受试样品,参照《保健食品检验与评价技术规范（2003版）》设计实验。300g左右Wistar雌性大鼠去除卵巢后,分为手术对照组（Operation control group,OC）、假手术对照组（Sham operation control group,SOC）、碳酸钙对照组（Calcium carbonate control group,CC）、样品低剂量组（Low dose group,L）、样品中剂量组（Medium dose group,M）、样品高剂量组（High dose group,H）,补钙13周后处死大鼠,取股骨进行股骨长度、BMD及骨钙含量测定,并增加观察其他与骨代谢相关指标包括子宫系数,肾脏系数,股骨重量,血清钙（Calcium,Ca）、磷（Phosphorus,P）含量,碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase,ALP）活性,骨钙素/骨谷氨酸蛋白（Osteocalcin/Bone Gla Protein,OT/BGP）、β 胶原交联（β-Crosslaps,β-CTX）、Ⅰ型胶原交联氨基端肽区（Cross Linked N-Telopeptide of Type Ⅰ Collagen,NTX）等骨转换及骨组织形态学指标。2.采用生长发育期大鼠“低钙饮食”制作大鼠骨钙缺乏模型,模拟因钙摄入不足致骨质流失;并选择已上市具有增加BMD功能（不含植物雌激素）的受试样品,参照《保健食品检验与评价技术规范（2003版）》设计实验。60-75g的Wistar雌性大鼠,按体重随机分为低钙对照组（Low calcium control group,LC）、碳酸钙对照组（Calcium carbonate control group,CC1）、样品低剂量组（Low dose group,L1）、样品中剂量组（Medium dose group,M1）、样品高剂量组（High dose group,H1）、正常对照组（Normal control group,NC）,补钙13周后处死大鼠,取股骨进行股骨长度、BMD及骨钙含量测定,并增加观察其他与骨代谢相关指标包括股骨重量,血清Ca、P含量,ALP活性,OT/BGP、β-CTX、NTX等骨转换及骨组织形态学指标。结果1.去势大鼠模型:（1）与SOC组比较,去势大鼠BMD及骨钙含量降低（P＜0.01）,体重升高（P＜0.01）,子宫、肾脏系数降低（P＜0.05,P＜0.01）,血清Ca、P含量降低（P＜0.01）,ALP活性升高（P＜0.05）,OT/BGP、NTX升高（P＜0.05）,股骨重量下降（P＜0.01）,皮质厚度及骨小梁面积百分比下降（P＜0.01）,提示缺钙模型造模成功。（2）补钙实验中,补钙组BMD及骨钙含量升高,尤其以H组差异明显（P＜0.05,P＜0.01）,在体重、血清P含量、OT/BGP、NTX、股骨长度、股骨重量、皮质厚度、骨小梁面积百分比表现出的差异（P＜0.05,P＜0.01）,提示补钙受试样品具有增加BMD、改善骨骼健康功能。（3）对全骨BMD与各项指标进行相关性分析,发现体重与BMD呈负相关,血清P含量、中点BMD、远心端BMD、股骨重量、骨钙含量、皮质厚度、骨小梁面积百分比与BMD呈正相关。OT/BGP、NTX和股骨长度虽表现出组间差异,但与BMD之间未见相关性（P＞0.05）。2.生长发育期大鼠模型:（1）与NC组比较,LC组大鼠BMD及骨钙含量降低（P＜0.01）,股骨重量、皮质厚度下降（P＜0.01）,ALP活性升高（P＜0.05）,提示缺钙模型造模成功。（2）补钙实验中,补钙组较LC组BMD及骨钙含量升高,尤其以H1组差异显著（P＜0.05,P＜0.01）,在股骨重量、ALP活性、β-CTX、NTX、皮质厚度表现出的差异（P＜0.05,P＜0.01）,提示补钙受试样品具有增加BMD、改善骨骼健康的功能。（3）对全骨BMD与各项指标进行相关性分析,发现β-CTX与全骨BMD呈负相关,股骨重量、骨钙含量、中点BMD、远心端BMD、皮质厚度与全骨BMD呈正相关。ALP活性及NTX虽表现出组间差异,但与全骨BMD之间未见相关性（P＞0.05）。结论1.对于含有植物雌激素等成分不含钙或不以补钙为主的、适合绝经后女性的骨健康功能食品:可选去势大鼠为实验模型;可选用体重、血清P含量、BMD、股骨重量、骨钙含量、皮质厚度及骨小梁面积百分比作为判定指标;可选用股骨长度、OT/BGP、NTX作为参考指标。2.对于以补钙为主的适合普通人群的骨健康功能食品:可选生长发育期大鼠13周“低钙饮食”为实验模型;可选用BMD、β-CTX、股骨重量、骨钙含量、皮质厚度作为判定指标;可选用ALP活性及NTX作为参考指标;建议去除原方案中的体重和股骨长度两指标。