论文部分内容阅读
随着抗生素的使用越来越普遍,环境中的抗生素残留已经引起了人们的极大关注。氟喹诺酮类药物作为几种使用最广泛的抗生素,其在环境中的残留在世界各地已经多次被报道。其中,诺氟沙星是报道得最多的氟喹诺酮类药物残留之一。传统的高效液相色谱-质谱法检测诺氟沙星的费用昂贵、耗时长、样品前处理复杂。因此,本研究致力于开发一套快速、经济、可靠且能够一次处理大量样品的检测技术,以适应监测环境中诺氟沙星残留的需要。主要内容如下:
1、合成了诺氟沙星、氧氟沙星和环丙沙星完全抗原,并使用三种不同的免疫方案对新西兰大白兔进行免疫,获得了三种抗体。通过对测试条件的初步优化,对每种抗体均进行了检测限和灵敏度的测定,最后筛选出灵敏度最高的抗诺氟沙星抗体。
2、使用抗诺氟沙星抗体对测试条件进行了进一步优化,如包被的时间和温度、封闭液的筛选、抗原抗体反应的时间和温度等。
3、使用抗诺氟沙星抗体建立了酶联免疫分析方法测定水环境中的诺氟沙星。方法的检测限达到0.016μg/L;标准曲线工作线性范围在0.1-10μg/L;IC50为2.2μg/L。在污水、井水和河水中的回收率达到74.2-104.8%,相对标准偏差在2.9-4.7%之间。与七种常见的氟喹诺酮类药物的交叉反应率均低于1%,显示出抗体的高度特异性。
4、使用酶联免疫方法对环境样品进行了测定,所得结果与高效液相色谱-串联质谱进行比较,显示出高度的线性相关性(r2=0.983),证实了方法的可靠性。