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背景在急性心肌梗死发生后,及时的药物及急诊冠状动脉支架植入术或心脏外科搭桥尽快的恢复心肌的血流再灌注成为挽救生命的重要手段,但是紧急开通血管虽然能够及时的恢复心肌的血流在灌注,但其带来的缺血-再灌注损伤往往让血管再通带来的受益大大减少,心肌梗死的死亡率只是得到了暂时的控制,而心力衰竭等死亡风险却在无形中加剧。因此,现如今对于恶性心血管疾病的处理措施不仅仅是恢复心脏的血供,而且要同时预防由于缺血-再灌注带来的心肌损伤。随着对Micro RNA越来越越多的研究,其在心脏保护方面的作用逐渐被发现。而PI3K/Akt信号通路作为细胞内重要的生存通路,其在缺血-再灌注后的心肌保护作用早已被认可。且我们发现多种microRNA的心脏保护作用中均有PI3K/Akt通路的参与。目的1.确定miRNA-499在心肌-缺血再灌注损伤发生之后时候是否具有心脏保护作用。2.对miRNA-499是否通过激活了PI3K/Akt信号通路发挥其心脏保护作用进行研究和探讨。方法1.模型及分组将45只大鼠随机分为假手术组,心肌缺血-再灌注手术组(MIRI组),microRNA-499激动剂预处理缺血-再灌注组(agomir组)。假手术组仅在左冠状动脉下穿线但并不结扎冠状动脉左前降支,MIRI组结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支,结扎30min,松开结扎线2h,建立大鼠心肌缺血-再灌注模型;agomir组于建立缺血-再灌注模型前48h注射mi R-499激动剂。2.检测各组microRNA-499及PI3K表达量采用Real Time PCR(RT-PCR)检测各组microRNA-499及PI3K基因表达量。3.检测各组Akt及磷酸化后的Akt的表达量采用Western Blot检测各组Akt及磷酸化后的Akt(P-Akt)表达量。4.比较各组心肌梗死面积在大鼠心肌缺血-再灌注末摘取大鼠心脏,采用TTC染色法比较各组心肌梗死面积。结果1.各组miR-499表达量比较与假手术组(1.14±0.199)相比,MIRI组mi R-499表达量(0.33±0.11)明显减少(P<0.01);与MIRI组比较,agomir组mi R-499的表达量(2.08±0.35)明显升高(P<0.01),而同假手术组相比表达量也明显升高(P<0.01)。2.各组PI3K表达量比较与假手术组(4.51±1.92)相比,MIRI组PI3K表达量(1.02±0.09)明显减少(P<0.01);与MIRI组比较,agomir组PI3K的表达量(2.91±0.49)明显升高(P<0.01),而同假手术组相比表达量减少(P<0.01)。3.各组Akt磷酸化活性的比较Akt蛋白磷酸化活性主要由P-Akt与Akt的比值来表示,与假手术组(0.49±0.12)相比,MIRI组Akt磷酸化活性(0.26±0.03)明显降低(P<0.01);与MIRI组比较,agomir组Akt的表活性(0.86±0.01)明显升高(P<0.01),而同假手术组相比Akt的磷酸化活性也有较明显的升高(P<0.01)。4.各组心肌梗死面积的比较与假手术组(0.05±0.007)相比,MIRI组心肌梗死面积(16.14±4.08)明显增多(P<0.01);同假手术组相比agomir组心肌梗死面积(7.26±2.03)较大(P<0.01)但与同同样行缺血-再灌注手术的MIRI组相比心肌梗死面积却是明显降低(P<0.01)。结论1.MiRNA-499能够减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤;2.MiRNA-499在心肌缺血-再灌注损伤中起到心肌保护作用是通过激活了PI3K/Akt信号通路。