抗逆相关DREB基因转化小麦及功能鉴定

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近年来,转录因子在农作物抗逆育种中的应用受到了广泛关注。一个转录因子可以调控多个性状相关的基因表达,通过增强一些关键调节因子的作用,可以增强抗逆相关基因在植物中的表达,使植物的抗逆性得到综合性改良。在作物抗非生物逆境育种方面,传统育种方法是通过改良个别性状来提高作物的抗逆性而分子育种则从改良或增加一个关键的转录因子的调控能力着手,可能是提高作物抗逆性的更为有效的方法和途径。 关于抗逆相关DREB( Dehydration Responsive Element Binding)转录因子的作用机理,目前研究较为透彻。在本课题组从棉花、大豆中分离、克隆到了抗逆相关的GH、GM-DREB(GH,棉花拉丁文缩写;GM,大豆拉丁文缩写)转录因子基因的基础上,本研究首次证明利用来自拟南芥的Rd29A启动子在小麦中具有诱导活性,并利用Rd29A启动子和小麦中常用的组成型启动子Ubi构建了包含GH、GM-DREB转录因子基因的七种植物表达载体pRdGH-Bar、pRdGM-Bar、pRdGH 、pRdGM、pRdGUS、pUbiGH、pUbiGM,以山东地区大面积推广的小麦品种鲁麦14号、鲁麦22号、鲁麦23号及扬州地区大面积种植的小麦品种扬麦10号为受体材料,通过基因枪介导法首次将克隆到的、来自于棉花、大豆中抗逆相关的GH、GM-DREB转录因子基因转入了小麦,共轰击8400多块小麦幼胚愈伤组织,获得了247株T0代转基因再生植株。通过PCR分子检测,筛选到了59株T0转基因阳性植株,转化率为0.7024%,并从中随机取8株材料进行RT-PCR分析,其中有4株扩增出GH、GM-DREB基因片断,说明GH、GM-DREB转录因子基因已整合到小麦基因组中,而且具有一定的转录水平。T1代转基因植株经在含0.6%NaCl、10%PEG培养基上进行功能鉴定,结果表明鲁麦22品种的转基因植株表现的耐盐、抗旱效果比对照植株明显,而扬麦10号转基因植株表现的耐盐、抗旱效果与对照植株差异不明显。
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