论文部分内容阅读
以宁夏枸杞新优品种(系)为研究材料进行花药离体培养,初步探讨了影响花药离体培养愈伤组织诱导和胚状体形成的因素,建立了宁夏枸杞花药离体培养愈伤组织诱导体系和直接成苗体系,并对获得的再生植株及已移栽的花培植株进行鉴定,为宁夏枸杞新品种选育奠定基础。研究结果如下:
1、建立了宁夏枸杞花药离体培养愈伤组织诱导体系。采集小孢子处于单核靠边期的09-01花蕾,经3d(4℃)低温预处理后,将花药接种于含有1mg/L2,4-D、0.5mg/L6-BA和1.5 mg/LKT的MS培养基中,放置于25±1℃、黑暗条件下愈伤组织诱导率较高。
2、建立了宁夏枸杞花药离体培养胚状体诱导体系。采集小孢子处于单核靠边期的09-09花药,经3d低温(4℃)低温预处理后,将花药接种于含有0.1mg/L NAA、0.5mg/L6-BA、0.896活性碳的MS培养基中,33℃高温、黑暗培养5d后转移至25±1℃光照条件下胚状体诱导率较高。
3、利用根尖染色体压片法对获得的再生植株进行细胞学鉴定,由胚状体获得的再生植株为早期自然加倍的二倍体植株。愈伤组织产生的再生植株为单双倍体植株。
4、对44份宁夏枸杞材料(其中35份为花培材料)进行RAPD分析,结果发现28份花培材料与供体植株相比,扩增条带产生了差异,说明宁夏枸杞通过花药培养变异较广泛。