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目的:探讨维生素D(Vitamin D,VD)对TGF-β1诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN)间质转化的影响。方法:体外培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN),分为正常对照组(A)、TGF-β1组(B)、TGF-β1+VD组(C)、TGF-β1+ICG001组(D)、TGF-β1+VD+ICG001组(E),按TGF-β1 10 ng/ml,维生素D 1μM,ICG001 5μM浓度给药。先用VD、ICG001或VD+ICG001预先处理细胞,培养了1天后往各组中加入TGF-β1。2天后,观察各组细胞在形态学上的改变,并用显微镜拍照记录;Western blotting检测E-钙黏素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及纤维连接蛋白(Fn)表达水平,Image J软件分析各组蛋白条带的灰度值;Real-time PCR法测定各组细胞Snail的相对表达量。结果:镜下正常组RLE-6TN细胞呈典型的铺路石样改变,细胞间连接紧密,而B组细胞形态明显呈梭形改变,细胞间隙明显增大。C组、D组相较B组细胞倾向铺路石样改变,细胞间隙有所缩小。E组细胞则大多呈铺路石样改变,间隙更小,形态接近正常组。Western blotting分析,与正常组α-SMA(0.27±O.04)、Fn(0.36±O.02)、E-cadherin(0.93±O.07)比较,B组α-SMA(0.95±O.05)、Fn(0.82±O.03)表达量显著增多,E-cadherin(0.32±O.08)则显著的减少(P<0.05)。C、D、E各组α-SMA(0.81±O.02、0.80±O.04、0.69±O.06)、Fn(0.62±O.05、0.65±O.03、0.46±O.08)表达量较B组减少(高于正常组),E-cadherin(0.55±O.03、0.57±O.06、0.83±O.08)的表达却相对增多(低于正常组)(P<0.05)。E组与C组和D组比较α-SMA、Fn表达量减少,然而E-cadherin表达量增多(P<0.05)。C组与D组比较E-cadherin、α-SMA及Fn表达量差异无统计学意义(P>0.05)。Real-time PCR结果显示,B(3.73±O.08)、C(2.66±0.07)、D(2.68±0.06)、E(1.72±0.04)组与A组(1.00±0.00)比较Snail表达均上调,C、D、E组与B组比较Snail则表达下调,E组与C、D组比较Snail表达也下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。C、D两组组间比较,Snail表达未见显著统计学差异(P>0.05)。结论:1、TGF-β1可诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞发生EMT,β-catenin是TGF-β1介导的EMT途径中重要的信号分子;2、VD可以抑制TGF-β1诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞间质转化;3、VD+ICGOO1作用可以更强烈的抑制TGF-β1刺激下大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的间质转化;4、VD抑制TGF-β1诱导RLE-6TN的间质转化,机制可能是VD负向调控Wnt/β-catenin信号通路,与ICG001发挥协同作用,起到抗纤维化的效应。