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目的:通过进行小鼠脑微血管内皮细胞的分离与原代培养,并将其用于本课题的体外实验研究细胞模型;建立内毒素血症小鼠模型,研究及评价α-黑素细胞刺激素(α-melanocyte stimulating hormone,α-MSH)及其类似物对小鼠内毒素血症模型小鼠和脑微血管内皮细胞在炎症因子LPS刺激下,产生组织因子(Tissue factor,TF)和组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor,TFPI)的调节作用。方法:进行小鼠脑微血管内皮细胞的分离与原代培养,建立本课题的细胞模型进行体外实验研究,比较和探讨浓度为10-7mol/L的α–MSH、NDP-MSH、多肽39在不同时间段处理经LPS刺激的脑微血管内皮细胞,培养6h、8h分别收集上清和细胞,ELISA、RT-PCR检测TF和TFPI的表达;每只小鼠腹腔注射1μgLPS和20mgD-Gal,建立内毒素血症小鼠模型,进行体内实验研究,内毒素血症小鼠模型在不同时间段分别给予2.5mg/kgα–MSH、NDP- MSH、多肽39,分别于LPS刺激后6h、8h取小鼠眼眶血,小鼠采血后颈椎脱臼处死小鼠,取肝、肺、脾、肾等脏器,ELISA检测小鼠血清中TF和TFPI的含量,RT-PCR检测小鼠组织中TF mRNA、TFPI mRNA表达。结果:体外实验研究结果显示,浓度为10-7mol/Lα–MSH、NDP-MSH、多肽39,均能抑制原代培养的小鼠脑微血管内皮细胞产生TF(P<0.01),且多肽39抑制TF产生的作用优于α–MSH、MSH-NDP;但α–MSH、NDP-MSH、多肽39三种多肽没有显示出上调TFPI产生的作用。体内实验结果显示,内毒素血症小鼠模型在不同时间段给予三种多肽,均能显著的抑制TF的表达(P<0.01),6h和8h采血组统计学处理无显著性差异;三种多肽均有上调TFPI的表达作用(P<0.05),在6h采血时,在LPS刺激后2h给予三种多肽,多肽39的作用要优于α–MSH、NDP-MSH;8h采血时,与LPS同时或者之后1h给予三种多肽,上调TFPI表达作用显著(P<0.05),多肽39优于α–MSH、NDP-MSH。结论:本研究结果表明α-MSH、NDP-MSH、多肽39对TF和TFPI表达具有调节作用,迄今未见相同研究报道,为进一步阐明α-MSH、NDP-MSH、多肽39的抗炎作用机制,以及将来的应用研究提供了新的、可信的实验依据。