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UP302化学名称为1-（2,4-二羟苯基）-3-（2,4-二甲氧基-3-甲苯）丙烷,是从桔梗兰中提取出来的新型天然植物活性物质,是一种新型酪氨酸酶抑制剂。由于酪氨酸酶的活性与色素障碍性皮肤病、食品褐变等均有密切关系,新型酪氨酸酶抑制剂UP302对色素障碍性皮肤病的治疗、食品保鲜及农业抗虫领域均具有重要意义。目前,研究人员正将UP302开发成一种治疗色素障碍性皮肤病的新型药物,因此对其开展揭示其ADME（吸收、分布、代谢和排泄）速度和状况的临床前药代动力学（Phamacokinetics, PK）和毒代动力学（Toxicokinetics, TK）的研究是十分必要的。本研究课题建立了测定大鼠血浆、皮肤、尿液、粪便以及微粒体体系中UP302的超高效液相-串联质谱的方法,都进行了相应的方法学验证,并成功将其应用于UP302大鼠临床前药代动力学研究。第一,采用甲醇提取生物样品中UP302,以大豆苷元为内标,在Hypersil Gold C18色谱柱上以流动相甲醇-5 mmol·L-1甲酸铵水溶液梯度洗脱,流速0.2 mL·min-1,柱温30°C;在电喷雾离子化电离源上以选择反应监测方式进行负离子检测,用于定量分析的离子反应分别为301.1→135.2（UP302）和m/z 252.9→132.0（大豆苷元）。本方法的特异性、灵敏度、检测范围、重现性、准确度和精密度均满足药代动力学的研究要求。第二,研究了大鼠尾静脉注射5 mg·kg-1 UP302在体内的吸收情况。大鼠尾静脉注射5 mg·kg-1 UP302,采集给药后2,5,15,30,45 min,1,2,3,4,6 h血样,利用LC-MS/MS测定UP302的含量,采用WinNonLin 5.2.1软件的非房室模型分析计算UP302静注血浆药代动力学参数。结果表明,UP302在大鼠体内半衰期短,体内分布较广,体内固有清除率大。第三,研究了UP302乳膏透皮给药后,在大鼠体内的吸收排泄情况。两组剃除背部脊柱两侧毛发的大鼠在脱毛处皮肤涂上UP302乳膏10 mg·cm-2（以UP302计为0.2 mg·cm-2 ）,给药面积为3 cm×4 cm。一组大鼠在给药前和给药后1,2,4,6,8,12,16,20和24 h采集血样,并在给药后24 h取给药部位皮肤,另一组大鼠用于收集24 h粪便和尿液。测定大鼠给药部位皮肤、粪便和尿液中UP302含量。血浆、皮肤和粪便中的UP302透皮分布分数分别为8.07%、0.087%和0.091%,24 h尿中未发现UP302。皮肤上残留的UP302乳膏量为78.96%。第四,通过体内药动学结果显示,UP302消除半衰期很短,有很可能是肝药酶快速代谢快所致,因此继续开展了UP302在体外肝微粒体孵育体系中的稳定性的研究。首先建立了大鼠肝微粒体体系的超高相液相色谱-串联质谱检测方法并进行了方法学验证,其次对大鼠肝微粒体体外孵育体系的孵育时间、底物浓度、酶浓度等条件进行了摸索和优化。其次在已优化好的孵育时间、底物浓度、酶浓度等条件的基础上,研究UP302体外代谢情况。确定了酶动力学参数,最大反应速度Vmax为196.08μmol·L-1·min-1·g-1 ,米氏常数Km为14.98μmol·L-1,内在代谢清除率CLint为13.09 mL-1·min-1·g-1。第五,研究了UP302体外稳定性情况。UP302孵育在大鼠、狗、猴和人血浆中,测定不同时间血浆中剩余UP302百分含量,结果显示,UP302含量百分比在四种生物血浆中均存在明显下降,前4 h下降较快,游离UP302剩余量均在40%以下。4 h后游离UP302浓度趋于稳定。对照组pH 7.4磷酸盐缓冲液中UP302含量百分比无明显变化。