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赶黄草这一丰富的苗药资源,在民间应用历史悠久,保肝疗效不容质疑,但由于其化学成分不明确,质量不稳定,缺乏科学的质量控制方法,因而难以保证其“安全、有效、稳定和可控”。本课题在现有文献研究的基础上,对赶黄草的化学成分进行了深入研究,建立了其HPLC指纹图谱,并对其7种主要成分进行了UPLC定量分析,完善和提高现行质量控制方法,更加全面、合理的对赶黄草进行质量控制。 利用现代分离技术,从赶黄草醇提物中共分离得到20个化合物,经过色谱法和各种光谱技术鉴定出其中14个化合物,分别是:山奈酚(kaempferol,2)、(7’E)-2’,3,4-trihydroxy-2,4’-epoxy-8,5’-neolign-7’-en-7-one(4)、槲皮素(quercetin,5)、(7’E)-3,4,8-trihydroxy-2,4’-epoxy-8,3’-neolign-7’-en-7-one(6)、(7E)-3,4-dihydroxy-2,4’-epoxy-8,3’-neolign-7’-en-7-one(7)、乔松素-7-O-β-D-葡萄糖苷(pinocembrin-7-O-β-D-glucoside,8)、短叶苏木酚(brevifolin,9)、没食子酸(gallicacid,10)、n-丁基-β-D-吡喃果糖苷(n-butyl-β-D-fructopyranoside,11)、phloroacetophenone4-O-β-D-glucopyranoside(13)、槲皮素-3-O-α-鼠李糖苷(quercetin-3-O-α-rhamnoside,14)、SCH644343(15)、pinocembrin-7-O-[3”-O-galloyl-4”,6”-hexahvdroxydiphenoyl]-β-glucose(16)、ThonningianinA(20)。其中4、6、7为新化合物。 采用HPLC方法,Agilent Zorbax SB-C18(4.6×250mm,5μm)色谱柱及AgilentZorbaxSB-C18(4.6×20mm,5μm)保护柱,乙腈-0.025%磷酸水为流动相梯度洗脱,检测波长为270nm,流速为0.8ml/min,柱温为30℃,进样量为5μl。建立了赶黄草HPLC指纹图谱,确定了其15个共有峰,16批赶黄草的相似度在0.831-0.983之间,并得到了其HPLC对照指纹图谱。 采用UPLC方法,Waters ACQUITY UPLC HSST3(2.1×150mm,1.8μm)色谱柱及Waters ACQUITY UPLC在线过滤器,乙腈-0.05%磷酸水为流动相梯度洗脱,检测波长为270nm,流速为0.3ml/min,柱温为45℃,进样量为3μl。对16批赶黄草中的7种主要成分进行了含量测定。 指纹图谱结合多指标成分含量测定的方法形成了赶黄草质量控制新模式。如此,将更加有效的体现中药成分的整体性和综合作用,从而更好的评价赶黄草的质量,促进该传统药物的广泛应用,推动民间药物的标准化、现代化,并对于今后规范其临床用药的安全性和有效性方面具有积极的意义。