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灰树花是一种味道鲜美同时又具有丰富药用价值的真菌。它有抑制高血压和肥胖症的功效;可预防贫血、坏血病、动脉硬化和脑血栓的发生;并具有抗衰老、抗癌的功效。其中的抗高压的功效主要源于其中的一个具有ACE抑制活性的小肽(Val-Ile-Glu-Lys-Tyr-Pro)。本文对灰树花中ACE抑制小肽的提取纯化工艺进行了研究。 建立了马尿酸的高效液相色谱分析方法。色谱条件:色谱柱DiamonsilTM C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相乙腈-0.2%磷酸溶液(30∶70),流速:1.0mL·min-1,检测波长:228nm;结果证明该法是一种新的快速准确实用的检测马尿酸的方法。 建立了ACE抑制剂的高效液相色谱分析方法。色谱条件:色谱柱DiamonsilTM C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:流动相A:5%水—95%乙腈(0.1%TFA,V/V/V),流动相B:95%水—5%乙腈(0.1%TFA,V/V/V);梯度模式:0—15min,30-70%B;流速:1.0mL·min-1;检测波长:280nm;结果证明该法是一种新的快速准确实用的检测ACE抑制剂的方法。 确定了灰树花中ACE抑制多肽提取的最佳条件。以水将灰树花粉末于30℃下以1∶20(m/v)的料液比搅拌提取2次,每次为6h。初提物ACE抑制剂含量2.49%,ACE抑制剂提取得率93.6%。 对ACE抑制多肽的纯化工艺进行了研究,确立了依次以SP700树脂吸附分离、Sephadex G-50凝胶层析分离、Sephadex LH-20凝胶层析分离、C18反相制备色谱分离的工艺。此工艺适合分别生产8.0%、25.0%、35.1