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硫化氢(H2S)作为活性硫(Reactive Sulfur Species, RSS)家族的一员,因其毒性而受到广泛关注。然而,最近研究结果表明H2S是具有生物活性的小分子物质,在生命活动中起着重要的作用。内源性的硫化氢可以分别由胱硫醚β-合成酶(CBS)和胱硫醚γ-裂解酶(CSE)通过催化L-半胱氨酸生成。硫化氢分子与生物体的许多生理及病理过程息息相关,内源性的硫化氢不仅作为大脑中的神经调节物质,还参与松弛血管,抗心肌缺血损伤,抗氧化等重要生理过程。然而,水平异常可能导致阿兹海默症,肝硬化,胃黏膜损伤和动脉高压等疾病。因此,监测细胞内硫化氢含量的变化对研究其参与的生理和病理过程具有重要意义。荧光探针检测法具有响应快、选择性和灵敏性高,以及在生物细胞方面应用性强的特点,使得利用荧光探针检测硫化氢的方法得到迅速发展。比率荧光探针相较于单发射荧光探针又具有背景干扰小、不受探针浓度以及仪器灵敏度的影响等优势,因此我们课题组致力于比率荧光探针的设计与合成。本论文主要包括以下内容:第一部分,综述荧光探针的识别机理及荧光探针的研究进展。第二部分,设计合成了一个基于香豆素-部花菁的H2S探针CPC,探针以香豆素为能量供体,部花菁为能量受体,合成了基于FRET机理的比率型荧光探针。探针自身的时候,用410 nm光激发,在474 nm处有较弱的荧光发射峰,在587nm处有较强的荧光发射峰;当加入H2S后,用同样波长的光激发探针,探针在587 nm处的荧光减弱,同时在474 nm处的荧光增强,从而达到比率检测H2S的目的。探针CPC具有快速响应(仅需7 min)、高的灵敏性(检测限40 nM)和良好的选择性以及膜透性。该探针被应用到HeLa细胞并实现外源性和内源性H2S的检测。此外,探针CPC还被成功定位到细胞内线粒体(共定位系数0.924)。