研究背景中药多糖在肿瘤的治疗上有着明显的效果并且毒副作用小、安全性高的特点,而且一些多糖复合作用时,效果比单味多糖更佳。对于茯苓多糖、灵芝多糖和香菇多糖的抗肿瘤和提高免疫功能的研究逐渐丰富,因为它们均具有抗肿瘤及调节免疫的作用,所以本课题研究这三种多糖配伍后的抗肿瘤和免疫调节作用。复方茯苓多糖口服液是由香菇、灵芝、茯苓按比例为1:1:2混合提取其多糖成分制成的口服液制剂,是一种新型的中药复合多糖制剂。本研究针对复方茯苓多糖口服液进行多糖含量测定,对其抗肿瘤效果和免疫调节功能进行药效学评价。研究目的1.复方茯苓多糖口服液多糖的含量测定。2.复方茯苓多糖口服液的抗肿瘤的药效评价。3.复方茯苓多糖口服液的免疫调节功能的药效评价。实验方法1.以计算机检索、手工追溯检索等手段相结合,查阅多糖成分的来源、药理作用、免疫调节机制以及中药多糖的现代研究与复合多糖的应用等资料,对多糖的研究概况进行科学分析。2.采用苯酚硫酸法对复方茯苓多糖口服液进行多糖含量测定。3.采用MTT法评价复方茯苓多糖口服液体外抗肿瘤效果。4.采用小鼠移植瘤模型评价复方茯苓多糖口服液体内抗肿瘤效果。5.采用巨噬细胞吞噬中性红实验测定复方茯苓多糖口服液对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的影响。6.采用淋巴细胞增殖实验测定复方茯苓多糖口服液对荷瘤小鼠淋巴细胞功能的影响。7.采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定复方茯苓多糖口服液对荷瘤小鼠NK细胞活性的影响。实验结果1.复方茯苓多糖口服液多糖的含量测定实验测得复方茯苓多糖口服液多糖含量约为17mg/ml,原料药茯苓提取物的多糖含量约为36%。2.复方茯苓多糖口服液的抗肿瘤实验2.1体外抗肿瘤实验复方茯苓多糖口服液不同浓度下体外对人胃癌BGC-823细胞,人喉癌Hep-2细胞的生长有一定抑制作用,且呈一定的量效关系,中低浓度时对Hep-2的生长抑制作用比BGC-823细胞强。2.2体内抗肿瘤实验复方茯苓多糖口服液对小鼠S180和H22皮下移植瘤生长有显著的抑制作用,高剂量下肿瘤抑制率达到40%以上,而复方茯苓多糖口服液和香菇菌多糖片对昆明小鼠的胸腺指数及脾脏指数没有明显影响。复方茯苓多糖口服液多糖剂量为100mg/kg时使S180腹水瘤小鼠生命延长率达到14.28%,并有统计学差异,效果优于单纯口服茯苓多糖。3.复方茯苓多糖口服液对免疫功能的影响复方茯苓多糖口服液能增强S180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,但比香菇菌多糖片对巨噬细胞吞噬功能的促进效果稍弱。复方茯苓多糖口服液能增强荷瘤小鼠淋巴细胞增殖水平和NK细胞对靶细胞的杀伤功能,并且与香菇菌多糖片的促进水平相当,而且复方茯苓多糖口服液组与香菇菌多糖片给药组的淋巴细胞增殖水平和NK细胞活性可与正常小鼠相当。实验结论1.苯酚-硫酸法可有效测定复方茯苓多糖口服液和茯苓提取物的多糖含量,从而确定药效学实验中各组的给药剂量。2.复方茯苓多糖口服液能抑制人胃癌BGC-823细胞,人喉癌Hep-2细胞的生长,并且呈一定的量效关系,并且对BGC-823和Hep-2细胞的敏感程度不同。3.复方茯苓多糖口服液能抑制小鼠S180和H22肿瘤生长,对实体瘤有显著抑制作用,而对S180腹水瘤抑制作用较弱。4.复方茯苓多糖口服液能增强S180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和NK细胞对靶细胞的杀伤作用,能促进淋巴细胞增殖水平,并且对细胞免疫比体液免疫的调节作用更强。