可控活性聚合方法构建单链超内环化聚合物基因载体

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基因疗法长期以来被认为是有可能成为各种遗传疾病的一线治疗方法。然而,由于核酸(DNA和RNA)不能穿透细胞膜,直接递送核酸有许多局限性。近年来,在基因递送系统领域的研究过程中,由于相对容易的转染过程,更高的转染效率和更好的安全性,mRNA逐渐成为一个比DNA更有吸引力的选项。但是,和所有其他基因疗法一样,mRNA递送的主要挑战仍然在于细胞内核酸的有效递送。本文通过零价铜调节的可控/活性自由基聚合方法(Cu0&Cu II-mediated CRP)设计合成了单链超内环化三元共聚物poly(DMAEA-co-DSDA-co-UDA),以及一系列二元、三元聚合物作为对照,研究三组分在聚合物中的作用及不同投料比对聚合物性能带来的影响,并通过凝胶渗透色谱(GPC)、核磁共振氢谱(1H-NMR),透射电子显微镜(TEM),动态光散射(DLS)等系统表征聚合物的结构,证明该聚合物确实具有单链超内环化结构,且粒径尺寸在几百纳米之间,携带正电,可用于mRNA的递送。随后,经过一系列细胞实验,包括电泳,绿色荧光蛋白实验(GFP expression),荧光素酶实验(Luciferase transfection),AlamarBlue?细胞毒性实验,对聚合物的转染效率和毒性进行了综合评价,证明单链超内环化三元共聚物poly(DMAEA-co-DSDA-co-UDA)是一种新型的mRNA非病毒载体,具有高转染效率,低细胞毒性等优点。
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