纤维蛋白原和载脂蛋白免疫共振散射光谱分析

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第一部分:绪论综述了近年来共振散射技术在分析化学和液相金纳米微粒研究中的应用;介绍了金纳米微粒的制备、表征、在生化分析中的应用以及纤维蛋白原与载脂蛋白的分析进展。引用文献266篇。第二部分:免疫共振散射光谱分析法测定纤维蛋白原在pH 6.2的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液中,纤维蛋白原与羊抗人纤维蛋白原产生特异性结合,生成免疫复合物,体系在340nm与470nm处有较强的共振散射效应。当纤维蛋白原浓度在0.13~5.33μg·mL-1范围内,随着纤维蛋白原浓度的增加,两处的共振散射强度线性增强,方法的检出限为0.028μg·mL-1,用于定量分析人血浆中的纤维蛋白原,结果满意。第三部分:金纳米标记免疫共振散射光谱法测定痕量纤维蛋白原采用柠檬酸三钠改良法制备了粒径约为9.0nm的金纳米用于标记羊抗人纤维蛋白原。在pH 6.2的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液中,金标羊抗人纤维蛋白原与纤维蛋白原产生特异性结合,在PEG作用下,羊抗人纤维蛋白原包裹的金纳米微粒释放出来并发生了聚集,体系在580nm处的共振散射峰增强。当纤维蛋白原浓度在0.027~1.07μg·mL-1范围内,随着纤维蛋白原浓度的增加,体系在580nm处的共振散射强度线性增强,方法的检出限为1.14ng·mL-1,用于定量分析人血浆中的纤维蛋白原,结果满意。第四部分:载脂蛋白AI与B的免疫共振散射光谱分析在pH 6.8的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液中,羊抗人载脂蛋白AI、羊抗人载脂蛋白B与相应的抗原发生特异性结合,生成抗体抗原免疫复合物,体系在340nm与470nm处有较强的共振散射峰。当载脂蛋白AI在26.67~333.33 ng·mL-1范围内,载脂蛋白B在29.58~591.50ng·mL-1范围内,随着载脂蛋白AI与载脂蛋白B浓度的增加,两体系在340nm与470nm处的共振散射强度线性增强,方法的检出限分别为12.43ng·mL-1、14.04 ng·mL-1。用于定量分析人血清中的载脂蛋白AI与载脂蛋白B,结果满意。
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