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目的:旨在研究鼠源重组蛋白UBC13对RAW264.7细胞炎症因子表达的调节作用及其分子机制。方法:利用MTT法筛选鼠源重组蛋白UBC13在RAW264.7细胞中的安全浓度。免疫调节验证试验:分别设置鼠源重组蛋白UBC13组(20 μg/mL,10 μg/mL,5 μg/mL)、细胞对照组和PBS组。荧光定量PCR法检测不同浓度UBC13蛋白在不同时间点(3 h,6 h,9 h,12 h 和 24 h)对 RAW264.7 细胞中IL-6,TNF-α,IL-1β和 COX-2 4 种炎症因子mRNA相对表达量的影响。抗炎试验:建立LPS(100 ng/mL)与鼠源重组蛋白UBC13共同孵育的炎症细胞模型,分别设置鼠源重组蛋白UBC13组(20μg/mL,10μg/mL,5μg/mL)、细胞对照组、PBS组和LPS组。以荧光定量PCR,ELISA,Griess试剂和Western blot技术于药物处理24h后检测各试验组IL-6,TNF-α,IL-1β,COX-2和iNOSmRNA相对表达量和蛋白表达量。Western blot检测药物处理24h后各试验组细胞胞浆中p65,IκBα和p-IκBα,胞核中p65蛋白表达量。结果:免疫调节验证试验:荧光定量PCR试验结果显示在整个试验时间范围内IL-6,TNF-α,IL-1β和COX-2mRNA相对表达量呈逐步降低趋势。24h时,与细胞对照组相比,药物处理组IL-6,TNF-α,IL-1β和COX-2 mRNA相对表达量均显著降低(P<0.05),并且具有一定剂量依赖性。抗炎试验:荧光定量PCR试验结果显示在24 h时,与细胞对照组相比,LPS处理组IL-6,TNF-α,IL-1β,COX-2和iNOSmRNA相对表达量显著升高(P<0.05);与LPS组相比,药物各处理组IL-6,TNF-α,IL-1β和iNOS mRNA相对表达量显著降低(P<0.05),但COX-2的mRNA相对表达量无显著性变化(P>0.05)。ELISA和Griess试剂检测结果显示,与细胞对照组相比,LPS处理组IL-6,TNF-α表达量和NO分泌量显著升高(P<0.05);与LPS处理组相比,药物各处理组IL-6,TNF-α和NO分泌量均显著降低(P<0.05),Western blot检测IL-1β和COX-2表达量无显著性差异(P>0.05)。NF-κB通路验证试验结果显示:与细胞对照组相比,LPS处理组细胞胞浆p65和IκBα表达量显著降低(P<0.05),p-IκBα和胞核p65表达量显著升高(P<0.05);与LPS处理组相比,药物各处理组细胞胞浆p65和IκBα表达量均显著升高(P<0.05),p-IκBα和胞核p65表达量显著降低(P<0.05)。此外,以上所有试验中PBS组和细胞对照组间均无显著性差异存在(P>0.05)。结论:鼠源重组蛋白UBC13可能通过NF-κB信号通路抑制LPS激活的RAW264.7细胞中TNF-α,IL-6和NO的表达。证实鼠源重组蛋白UBC13具有一定的抗炎功能。