葡萄糖异构酶的固定化及其性能研究

来源 :华东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:simon_dai
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本文以Tween-20和Span-60为复合分散剂,以烯丙基缩水甘油醚和甲基丙烯酸缩水甘油酯为功能性单体,N,N-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂,采用反相悬浮聚合技术制备含环氧基团的聚合物载体GAMM,并将其应用于固定化葡萄糖异构酶,考察了固定化条件和异构化反应条件对固定化酶活性的影响以及固定化酶的使用性能。研究结果表明,固定化酶最佳负载量为每克载体加入0.3 mL游离酶,最佳固定化温度为25℃,最佳固定化时间为24 h;固定化酶与游离酶具有相同的最适反应pH值(7.5),固定化酶在pH=5~7.5的条件下比较稳定,固定化酶比游离酶具有更宽的pH适用范围,固定化酶的最适反应温度为65℃;游离酶的Km为0.36 mol/L,最大反应速率为1.3×10-3mol/L·min,而固定化酶Km为1.16 mol/L,最大反应速率为11×10-3 mol/L·min,固定化酶的最大酶活为(?)50 U/g;固定化酶在重复使用18次以后,仍能保持90%的初始活性,在4℃条件下储存6周仍能保持97%的初始酶活,在80℃以下固定化酶比游离酶具有更好的热稳定性。
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