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长春市主要的娱乐水体有南湖、北湖和净月潭。娱乐水体上可进行很多亲水休闲娱乐活动,春季、夏季和秋季都有游人戏水、游泳、垂钓和划船等。游客在进行这些亲水娱乐项目后,有可能引发急性肠胃疾病、呼吸道疾病、耳部感到不适和眼部感到不适等症状。原因可能与大肠杆菌O157:H7有关,它是一种新型有致病性的大肠杆菌,可使人类引发严重的循环系统和胃肠道疾病。因此开展长春市主要娱乐水体中大肠杆菌O157存活的影响规律研究,并以此为基础提出有效的风险管理策略,具有现实迫切性和实践意义。本实验以长春市三大主要娱乐水体为研究对象,以肠出血性大肠杆菌O157:H7为目标病原菌,重点探究大肠杆菌O157:H7的存活规律,找出大肠杆菌O157:H7在长春市娱乐水体中存活的关键影响因子。本实验分春季、秋季两批采集长春市三大主要娱乐水体共48个水样,分别进行理化性质测定,16S rRNA高通量测序,接种目标病原菌大肠杆菌O157:H7进行存活实验,最后分析了影响大肠杆菌O157:H7存活时间的关键因素。主要的结论有:(1)大肠杆菌O157:H7随着培养时间的增加数量逐渐降低,除个别样品外存活曲线均成凹状(p<1),大肠杆菌O157:H7下降到第一个数量级的时间最短,总体下降趋势为先快后慢。春季大肠杆菌O157:H7存活时间均值长于秋季。大肠杆菌O157:H7春季的存活时间介于35-135天,平均值为67天;秋季大肠杆菌O157:H7的存活时间介于31-106天,平均值为59天。大肠杆菌O157:H7在来自于北湖的水样中存活时间最久,南湖次之,存活时间最短的是在净月谭湖水中。大肠杆菌O157:H7在南湖中的存活时间介于31-107天,平均值为65天;大肠杆菌O157:H7在净月潭存活时间介于35-74天,平均值为50天;大肠杆菌O157:H7在北湖存活时间介于38-130天,平均值为77天。(2)根据16S rRNA高通量测序数据,得出长春市三大主要娱乐水体的样本复杂度(Alpha Diversity)有差异。根据主成分分析(PCA)、微生物群落网络分析,得出长春市三大主要娱乐水体的Beta Diversity各不相同。南湖的群落结构稳定性和多样性弱于北湖和净月潭。根据Mental检测结果、典范对应分析(CCA),可知微生物群落结构组成及多样性主要受盐度含量(EC)(p<0.0001)、氨氮(NH4+-N)(p<0.05)、总氮(TN)(p<0.0001)、总有机碳(TOC)(p<0.0001)等水样性质因素影响。长春市三大主要娱乐水体中的优势菌门有:变形菌(Proteobacteria33.57%)、放线菌(Actinobacteria29.45%)、拟杆菌(Bacteroidetes20.89%)、蓝细菌(Cyanobacteria11.78%)、疣微菌(Verrucomicrobia1.96%)。群落功能预测分析结果显示,在氨基酸转运和代谢、核苷酸转运和代谢、能源生产与转化、防御机制、细胞核结构等方面群落功能不同。(3)根据线性相关拟合结果知,大肠杆菌O157:H7的存活受娱乐水体环境因素影响了,包括理化性质和微生物群落结构组成稳定性和多样性的影响。在春季、秋季大肠杆菌O157:H7的存活时间与EC含量均呈正相关(p<0.05),大肠杆菌O157:H7存活时间与水样中TOC含量呈正相关,TN含量与大肠杆菌O157:H7存活时间呈正相关(P<0.05),NH4+-N含量与大肠杆菌O157:H7存活时间呈负相关,大肠杆菌O157:H7存活时间受季节变化的影响。大肠杆菌O157:H7的存活可能也会受娱乐水体中的微生物群落结构组成稳定性和多样性的间接影响。现阶段我国针对景观娱乐水体微生物风险的研究尚少,对常温环境下娱乐水体中大肠杆菌O157:H7存活行为研究结果可为预测致病菌的环境行为,评估其环境生态和健康风险,为控制大规模大肠杆菌O157:H7传染病暴发等提供背景信息和决策依据,为建立健康稳定的水生态系统提供丰富的背景信息。