rhBMP-2联合rhVEGF165对兔前交叉韧带重建后腱—骨愈合影响

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目的探讨局部联合应用重组人骨形态发生蛋白(rhBMP)-2和重组人血管内皮生长因子165(rhVEGF165)对兔前叉韧带重建后腱-骨早期愈合的影响。方法78只健康成年雄性新西兰大白兔,体重2.0~2.8kg,平均2.4kg,随机分为VB组、B组、V组、F组及正常组。前四组每组18只,正常组6只。建立双膝自体半腱肌前交叉韧带重建模型,正常组不做手术。VB组腱-骨界面注入以纤维蛋白胶(FG)为载体的rhBMP-2/rhVEGF165混合物;B组注入rhBMP-2和FG混合物;V组注入rhVEGF165和FG混合物;F组单纯注入FG;正常组不进行任何干预。术后第2、4、8周,每组随机应用过量戊巴比妥钠处死6只实验动物,取右膝关节标本,固定、脱钙、包埋、切片、苏木素-伊红染色,光镜下观察。左膝标本取下后,放置在-80℃冰箱中保存,实验前室温下解冻,固定在Instron E3000力学试验机行拉伸试验,测得骨-肌腱-骨复合体的最大载负荷(N)及刚度(N/mm)。结果组织观察结果显示,术后第2周VB组腱-骨界面连接紧密,成纤维细胞大量增生;B组连接紧密,可见少量软骨细胞;V、F组连接疏松,主要为纤维血管组织构成。术后第4周,VB组腱-骨界面初步形成四层结构,依次为肌腱、未钙化的纤维软骨、钙化的纤维软骨和骨组织;V、B、F组则主要为成熟的成纤维细胞构成,腱-骨连接紧密,骨隧道壁出现一定量成骨反应。术后第8周,VB组四层结构更明显,可见潮线;B组骨隧道壁侧成骨反应进步加强;V、F组腱-骨界面宽度进步变窄,成纤维细胞数目明显减少。生物力学测试显示,术后第2周,VB组、B组、V组及F组平均最大载负荷和刚度比较,差异无统计学意义(P>0.05);直到术后第4、8周,VB组平均最大载荷及刚度较V、B、F组大(P<0.05),均低于正常组;同时V、B组平均最大载荷及刚度较F组大(P<0.05)。结论rhBMP-2联合rhVEGF165对兔前交叉韧带重建术后早期腱-骨愈合具有促进作用,且联合效应强于各自单独效应。
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