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拟南芥CDKC;1和CDKC;2蛋白具有保守的PITAIRE基序,是动物正向转录延伸因子b(P-TEFb)催化亚基CDK9的同源物。P-TEFb是一种周期蛋白依赖性激酶,通过磷酸化七肽重复序列的第二位丝氨酸和DSIF亚基,调控RNA聚合酶Ⅱ转录过程中的延伸阶段。研究发现AtCDKC;1/AtCDKC;2双突变体比AtCDKC;2单突变体在植物生长和发育方面表现出更为明显和严重的缺陷,表明AtCDKCs可能在功能上冗余。 siRNA和miRNA是动植物中存在的两类小分子RNA,它们通过影响启动子活性、mRNA的稳定性和翻译效率三种方式调节基因的正常表达活动。通过导入双链RNA切割产生siRNA的方法来特异抑制基因已经广泛应用于基因功能研究。与动物miRNA不同,植物miRNA能够特异地影响目标基因的转录和翻译过程。过量表达人为改造的天然miRNA前体分子可以使特定基因表达下降,这种方法称为人工miRNA。目前,人工miRNA的方法已经在基因功能研究、植物抗病等方面成功得到应用。 在本研究中,为了揭示AtCDKC;1和AtCDKC;2在拟南芥生长发育中所起的作用,构建了单独抑制和共同抑制AtCDKCs一共3个人工miRNAs。另外,根据两者同源序列构建了能够体内转录引起RNAi的hpRNA载体。对转基因植株的分析发现AtCDKC;1和AtCDKC;2在拟南芥发育中除了部分功能冗余外,它们还起着各自不同的作用。