论文部分内容阅读
目的:创伤性关节炎在骨科临床诊疗中已很常见,它严重地困扰着患者日常生活和工作,给身心带来了极大的痛苦,给家庭及社会造成了极大的负担。但由于关节软骨内没有神经、血管及淋巴管,故缺乏营养供应,其损伤后自身难以修复。目前对其治疗的方法有很多,如软骨下骨钻孔术、骨膜及软骨膜移植术、自体软骨细胞移植术、基因和组织工程治疗等等,但这些大多处于实验阶段,临床疗效不肯定。有不少报道应用透明质酸钠关节内注射治疗退行性骨关节炎取得了良好的疗效,但关于透明质酸钠注射液对关节软骨直接损伤后是否能改善其修复,目前此方面的报道很少。本实验通过切断兔膝关节前交叉韧带,软骨下骨钻孔方法建立兔膝关节软骨全层缺损模型,初步探讨膝关节腔内应用透明质酸钠注射液对关节软骨损伤继发的创伤性骨关节炎的防治作用,为临床治疗创伤性关节炎提供实验依据。方法:用来实验的10只新西兰大白兔提前十天饲养,观察没有疾病并且能够正常进食及饮水后,再用于实验。术前十二小时禁食水,双侧后肢膝关节去毛备皮。将10只新西兰大白兔雌雄各半,共20个膝关节,先切断兔的膝关节前交叉韧带,再用直径为3.2毫米的骨科手术电钻,于股骨内髁关节软骨面中央处钻一直径为3.2毫米全层软骨缺损,深度要以缺损区域渗血为标准,然后用生理盐水冲洗干净。严格按照上述标准将20只膝关节制成直径为3.2毫米大小的关节软骨全层缺损模型,并将其配对分为两组:实验组和对照组(注:同一只兔子的两膝关节不编入同一组),每组各10个兔膝关节。在手术后的前8天,膝关节腔内不做任何药物注射,以便让手术创伤所引起的炎症反应逐渐消退。于术后第9天开始,右膝关节腔内注射1%透明质酸钠注射液0.2毫升,左膝关节腔内注射0.9%生理盐水0.2毫升,每5天膝关节腔内注射1次,共注射7次。于术后第8周将实验兔杀死,取各组膝关节软骨缺损修复组织,并进行大体形态观察评分;苏木素一伊红染色(即HE染色)的组织学形态观察;免疫组织化学研究Ⅱ型胶原的表达,并进行评分。结果: 1、用药5周后各组大体形态学表现:实验组:关节软骨表面的缺损区外形修复基本完全,缺损区主要由类软骨组织修复,关节内未见明显粘连;对照组:关节软骨表面的缺损区外形修复不完全,缺损区主要由红色肉芽组织覆盖,被修复的组织区域明显低于正常关节软骨表面,并见缺损区域周围组织退变较明显。用药5周后,实验组大体形态学评分高于对照组,有显著性差异(P<0.05)。2、用药5周后各组HE染色组织学观察:实验组由类软骨组织修复,被修复的组织表面比较平整,被修复的组织内细胞形态与正常关节软骨细胞非常相似,细胞层次比较明显,排列比较规律,下潮线大致恢复。对照组修复的缺损区可见大量纤维组织,被修复的组织表面不平整,缺损周围与正常关节软骨部分融合,其细胞形态与正常关节软骨细胞差别比较大,排列很不规律,细胞分层不明显,下潮线消失。用药5周后,实验组组织学评分高于对照组,有显著性差异(P<0.05)。3、用药5周后,实验组:缺损区域主要由类软骨组织修复,与周围的正常关节软骨结合紧密,被修复的组织浅层细胞内可见Ⅱ型胶原阳性表达,被修复的组织中间层及其底层细胞内未见Ⅱ型胶原阳性表达,细胞无成簇,排列比较规律;对照组:缺损区域主要由纤维组织修复,与周围的正常关节软骨仅部分连接,结合不紧密,只有少量细胞生成,组织浅层细胞内Ⅱ型胶原阳性表达较微弱,细胞排列欠规律。用药5周后,实验组Ⅱ型胶原软骨缺损区阳性表达高于对照组,有显著性差异(P<0.05)。结论:兔膝关节软骨全层缺损后给予透明质酸钠治疗,实验组缺损组织修复的效果比对照组显著,而且发现关节软骨全层缺损后给予透明质酸钠治疗可促进Ⅱ型胶原的恢复。