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猪细小病毒（PPV）与伪狂犬病毒（PrV）是引起猪繁殖障碍的两个主要病原。PPV和PrV引起的疾病在我国有很高的感染率和发病率，给我国的养猪业造成了巨大的经济损失。传统的常规疫苗对防制PPV和PrV的感染有一定的效果，但是存在不可避免的缺陷，为了更好的控制PPV和PrV感染，研制更加安全有效的PPV-PrV二价基因工程疫苗是解决这一问题的最好途径。 本实验分离得到了一株PPV新毒株，从病原学、血清学、分子生物学等几个方面对其进行了鉴定，将其命名为SY-99株然后提取该病毒DNA，以之为模板，利用PCR技术扩增其主要免疫原性基因即VP2基因，将VP2基因克隆到从酵母表达载体PpicZ α-B上，为研制PPV重组亚单位疫苗打下了基础。 通过序列分析，表明PPV VP2基因由1740个碱基组成，编码580个氨基酸。利用DNAsis、GeneDoc分析软件分析SY-99株VP2基因序列，并分别比较SY-99株与NADL-2（4973）株、NADL-2（5075）株、Kresse株、US-1株VP2基因核苷酸与氨基酸同一性。结果显示PPV SY-99株VP2基因与NADL-2（4973）株、NADL-2（5075）株、Kresse株、US-1株的核苷酸序列同一性分别为99.2％、99.3％、99.5％、99％；PPV SY-99株与NADL-2（4973）株、NADL-2（5075）株、Kresse株、US-1株VP2基因编码的氨基酸同一性分别为98.1％、98.3％、98.8％、96.6％，表明PPV SY-99株与Kresse株VP2基因的同源性最高，提示PPV SY-99株与Kresse株的病毒特性可能有相似之处。 以质粒PCR3-uni为模板，利用PCR技术扩增跨越人巨细胞病毒（CMV）极早期启动子和牛生长激素基因（BGH）polyA信号基因片断，然后将其克隆到经AccI酶切处理后的载体PTA上，得到了通用伪狂犬病毒表达载体pBdTK，将PPV SY-99株VP2基因亚克隆到pBdTK上，同时在TK同源臂上加上荧光素酶报告基因盒，得到了含有PPV VP2基因的PrV转移质粒。为构建表达PPV VP2基因的重组伪狂犬病毒从而研制PPV-PrV二价基因工程疫苗打下了基础。