玉米致死性坏死病是近年来严重危害亚洲、非洲等地玉米产区的重要病害之一,是由玉米褪绿斑驳病毒（Maize chlorotic mottle virus,MCMV）与马铃薯Y病毒科的一种或几种病毒复合侵染造成的,如玉米矮花叶病毒、小麦条纹花叶病毒、甘蔗花叶病毒等。MCMV是番茄丛矮病毒科（Tombusviridae）玉米褪绿斑驳病毒属（Machlomovirus）的唯一病毒,该病毒的基因组为正义单链RNA,可以产生两条亚基因组RNA（subgenomic RNA,sgRNA）,1.47 kb的sgRNA 1和0.34 kb的sgRNA 2。病毒的外壳蛋白（capsid protein,CP）由sgRNA 1产生,除了具有结构功能外,其他功能未知。本研究以MCMVCP为研究对象,通过研究MCMVCP的细胞核定位及其进核途径,初步探索了与MCMVCP核定位相关的进核蛋白因子importin α1a（ZmIMPα1a）和importinα1b（ZmIMPα1b）在病毒侵染中的作用,为研究MCMVCP的功能打下基础。利用农杆菌浸润及玉米原生质体瞬时表达研究MCMVCP的亚细胞定位。研究发现,在本生烟的表皮细胞中,MCMVCP能够定位在细胞核中,并且在核仁中积累;在玉米原生质体中,MCMV CP能够进入细胞核中;双分子荧光互补实验（bimolecular fluorescence complementation,BiFC）表明MCMV CP的二聚体或者多聚体能够进入玉米原生质体的细胞核。构建了 MCMVCP的一系列突变体,并在烟草表皮细胞中瞬时表达,以研究对MCMVCP细胞核定位起关键作用的区域,结果表明MCMV CP的N端富含碱性氨基酸的1-43 aa区域对于MCMV CP的细胞核定位起到重要作用。对MCMV CP进核的途径进行了研究。BiFC验证了 MCMV CP能够与受体分子ZmIMPα1a和ZmIMPα1b相互作用,表明MCMV CP可以通过经典的importin α/β进核途径进入细胞核。明确了 CP N端的1-43 aa区域介导了 MCMV CP与ZmIMPα1a和ZmIMPα1b的相互作用,进一步证明了其在MCMV CP细胞核定位中的重要作用。研究了 ZmIMPα1a和ZmIMPα1b在MCMV侵染过程中的功能。检测了 MCMV侵染对第一片系统侵染叶中ZmIMPα1a和ZmIMPα1b基因表达的影响。结果显示,在病毒接种后第7天和第10天,ZmIMPα1a和ZmIMPα1b基因表达显著上调。利用雀麦花叶病毒（Brome mosaic virus,BMV）介导的基因沉默体系在玉米植株中同时瞬时沉默ZmIMPα1a和ZmIMα1b基因的表达并挑战接种 MCMV（BMV-IMPα1/MCMV）,与对照植株相比（BMV-GFP/MCMV）,MCMVRNA 的积累量显著降低,说明ZmIMPα1a和ZmIMPα1b促进MCMV的侵染。另外,为了探索MCMVCP进入细胞核的功能,本研究构建了均一化酵母双杂交玉米cDNA文库,并以MCMV CP为诱饵进行文库筛选,发现CP能够与具有转录激活功能的MCMVP32相互作用。构建了研究蛋白是否具有转录调节功能的荧光素酶报告系统,利用此系统发现在玉米原生质体中MCMV CP能够激活荧光素酶报告基因的表达,这说明CP可能具有转录激活功能。