论文部分内容阅读
目的:通过构建慢性萎缩性胃炎（chronic atrophic gastritis,CAG）大鼠模型,观察安胃汤对CAG大鼠胃黏膜mTOR/ULK1信号通路的影响。方法:本课题共用实验大鼠84只,将其随机分为空白对照组、病理模型组、盐水对照组、胃复春组及安胃汤高、中、低剂量组,每组各12只。除空白对照组以外,其他各组通过氨水、脱氧胆酸钠和饥饿失常等综合因素建立CAG模型,造模成功后各组每天一次灌胃给药。空白对照组予以正常饲养,盐水对照组给予0.9%氯化钠注射液,胃复春组给予0.78g胃复春片悬浊液,安胃汤高、中、低各剂量组分别给予浓度为2.0g/m L、1.0g/m L、0.5g/m L的安胃汤。除空白对照组外其他各组予以相应药物进行灌胃治疗,按照1m L/100g灌胃,1次/d,连续给药28天。药物干预结束后,将各组实验大鼠处死,留取胃黏膜组织标本,采用HE染色法观察各组大鼠胃黏膜病理形态改变,Western Blot检测mTOR、ULK1、p-ULK1蛋白相对表达含量,实时荧光定量PCR方法检测mTOR、ULK1的表达情况。结果:1.一般情况:空白对照组大鼠的精神状态较好,毛发光泽,体重较前明显增加,饮食及排便正常。模型对照组、盐水对照组大鼠精神较差,反应稍迟钝,动作缓慢,毛发粗糙无光泽,进食、饮水明显减少。安胃汤高、中剂量组精神较好,反应灵敏,体重逐步增加,毛发有光泽,饮食及排便基本正常。安胃汤低剂量组、胃复春组大鼠精神一般,体重无明显变化,饮食、排便基本正常,改善效果比安胃汤高、中剂量组的稍差,但比模型组的效果好。2.胃黏膜病理形态改变:空白组大鼠的胃黏膜正常,结构完整,各层排列均比较整齐,上皮细胞、腺体未见萎缩。模型组上皮细胞出现萎缩,排列紊乱、稀疏,腺体的数目明显比空白组少,部分出现肠上皮化生。安胃汤高剂量组、中剂量组胃黏膜各层的结构基本正常,腺体排列紧密、规则,少量的炎症细胞。安胃汤低剂量组和胃复春对照组的腺体减少,数量间于安胃汤高、中剂量组与模型组之间,腺体排列稍稀疏,个别腺体萎缩并伴有有肠上皮化生。3.胃黏膜中mTOR、ULK1、p-ULK1蛋白的表达:在WB中,与空白组比较,模型组的胃黏膜组织中mTOR、p-ULK1蛋白表达明显上调,ULK1蛋白的表达下调（P＜0.05）。与模型组比较,各治疗组均能够下调胃黏膜中mTOR、p-ULK1蛋白的表达,上调ULK1蛋白的表达（P＜0.05）。胃复春组大鼠的胃黏膜组织中mTOR、ULK1、p-ULK1的表达与安胃汤高、中、低剂量组相比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。在PCR中,与空白组比较,模型组胃黏膜组织中mTOR的表达水平明显上调,ULK1的表达水平显著的下调（P＜0.05）。与模型组比较,各治疗组均能下调mTOR的表达,ULK1的表达水平显著的上调（P＜0.05）。胃复春组大鼠的胃黏膜组织中mTOR、ULK1的表达与安胃汤高、中、低剂量组相比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。安胃汤高、中、低剂量组之间的mTOR、ULK1的表达进行两两比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论:1.安胃汤能够明显改善CAG大鼠的精神活动、饮食、反应灵敏度等一般情况;2.安胃汤可以明显改善CAG大鼠胃黏膜组织的病理变化,具有明显的抗CAG作用;3.安胃汤能够抑制CAG大鼠胃黏膜mTORC1信号转导通路,抑制mTOR的表达,上调ULK1蛋白的表达;4.安胃汤与临床有效药物胃复春片均能明显促进CAG大鼠胃黏膜的修复,而安胃汤高、中、低剂量组之间无明显量效关系。