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固定化酶因具有提高酶的稳定性、反应后易与产物分离及可重复使用等优点,在生物、化工、食品、医药等方面有广泛的应用前景。在纺织印染行业,特别是羊毛织物的防毡缩整理,目前仍主要采用氯化/树脂法和蛋白酶法处理,固定化酶法则鲜为报道。本论文以磁性壳聚糖微球、pH敏感相分离高分子材料为载体分别对纺织用蛋白酶进行固定化研究,考察了固定化蛋白酶的制备条件、固定化蛋白酶的性质、催化动力学参数以及其在羊毛防毡缩整理中的应用。采用乳化交联法合成了磁性壳聚糖复合微球,以其为载体,戊二醛为交联剂制备了磁性壳聚糖微球固定化蛋白酶,通过单因素实验确定了最佳制备工艺条件。研究了磁性固定化蛋白酶的稳定性、重复使用性和催化动力学参数,并将其应用在毛织物针织物防毡缩整理中。结果表明:磁性壳聚糖微球呈规则球状,弱磁性,粒径在30-50μm范围内。磁性固定化蛋白酶最佳制备条件:EDC(1-乙基-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐)浓度为0.25%(w/v),戊二醛浓度为2.0%(v/v),蛋白酶缓冲溶液(pH=7.5)浓度为0.4%(v/v),固定化温度为40℃,固定化时间为90min。此条件下制备的固定化蛋白酶固载率为82.4%,酶活回收率可达65.8%。磁性固定化蛋白酶的耐热、耐酸碱和储存稳定性均优于游离蛋白酶;经使用30次后,磁性固定化蛋白酶保留原酶活力82.0%左右。蛋白酶经磁性壳聚糖微球固定化后,K_m值增大2.76倍,表明酶与底物亲和力变小。通过正交实验确定了磁性固定化蛋白酶在羊毛防毡缩整理的最优工艺,整理后织物的毡缩率为7.1%,失重率为6.4%,强力损失率为8.2%;等酶量的游离蛋白酶整理后织物毡缩率为6.9%,失重率为11.7%,强力损失率为19.1%。采用pH敏感相分离高分子Eudragit S-100为载体,制备了pH敏感相分离固定化蛋白酶,单因素实验确定了最佳制备条件。研究了固定化蛋白酶的稳定性、重复使用性和催化动力学参数,并将其应用在毛织物防毡缩整理中。结果表明:pH敏感相分离固定化蛋白酶最佳制备条件:Eudragit S-100浓度为2.0%(w/v),EDC浓度为0.2%(w/v),蛋白酶缓冲溶液(pH=7.5)浓度为1.0%(v/v),固定化温度为30℃,固定化时间为90min。此条件下制备的固定化酶固载率为89.6%,酶活回收率可达80.7%。pH敏感相分离固定化蛋白酶的耐热、耐酸碱和储存稳定性均优于游离蛋白酶;经使用30次后,固定化酶活力仍保留原酶活力77%左右。蛋白酶经Eudragit S-100固定化后,K_m值增大1.94倍,表明酶与底物亲和力变小。通过正交实验确定了pH敏感相分离固定化蛋白酶在羊毛防毡缩整理的最优工艺,整理后织物的毡缩率为6.4%,失重率为9.1%,强力损失率为7.8%;等酶量的游离蛋白酶整理后织物毡缩率为6.9%,失重率为11.7%,强力损失率为19.1%。