多胚现象是柑桔研究及育种实践中的一个重要问题，也是柑桔杂交育种最大的障碍，多胚性柑桔品种在杂交育种时，由于珠心胚的干扰抑制，致使有性胚在早期败育死亡，导致育种过程中很难获得真正的杂种苗，使多胚性柑桔杂交育种工作受到很大的限制。因此，探索高效的合子胚分离技术，在合子胚尚未败育之前将其分离出来进行培养，克服珠心胚的干扰，挽救早期败育的合子胚，从而获得杂种苗，提高杂种率，是多胚柑桔杂种实生苗培育的有效途径，具有重要的实践意义。本研究初步建立了多胚性柑桔早期合子胚的显微分离、离体培养及合子苗的鉴定体系，成功显微分离了柑桔早期合子胚并通过离体培养再生植株，具体结果如下：1、多胚性柑桔早期合子胚显微分离的最适时期为授粉后50—55d。利用显微操作系统，采用自制钢针(针尖大小控制在50μm左右)代替传统的微细玻璃针，可提高多胚性柑桔早期合子胚的分离效率。2、MS、White和MT三种基本培养基都适合柑桔早期合子胚的离体培养，柑桔早期合子胚成熟培养的最佳植物生长调节剂浓度配比为IAA1mg／L+BA20mg／L，适当提高培养基中蔗糖浓度(最适浓度为10％)、添加适量水解乳蛋白(最适浓度为400mg／L)有助于柑桔早期合子胚的生长发育。3、固体培养与悬浮培养方式均适合柑桔早期合子胚的成熟培养，但悬浮培养方式更便于观察调控。4、培养成熟的柑桔合子胚转入分化培养时，不需改变成熟培养时的植物生长调节剂配方，只需将蔗糖浓度降至2％，由暗培养改为光照培养即可自然再生植株。在此基础上若添加少量ZT(0.2mg／L)，能促进合子胚再生植株的速度。由成熟培养转入分化培养，再生植株的最佳时期为：a、固体培养的合子胚及其次生胚发育至子叶状形态出现时，即可认为是发育成熟，可以转接至分化培养基中再生植株。b、液体培养的合子胚子叶长度大约在1—1.5cm(培养时间约8星期)时，即可认为是发育成熟，可以转接至分化培养基中再生植株。5、经反复实验，确立了适合柑桔基因组DNA的快速提取方法和PCR反应的优化体系，筛选出6条扩增多态性较高的引物，对再生小苗进行了RAPD鉴定分析，从73株再生小苗中，鉴定出了61株合子苗，合子苗的比例达到83.6％。综合本研究所有研究结果表明，利用显微操作系统，显微分离多胚性柑桔早期合子胚，并进一步培养再生植株，可获得高比例的合子苗，是排除多胚性柑桔珠心胚的干扰抑制，促进多胚性柑桔有性杂交育种的有效手段。