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第一部分人脐带间充质干细胞条件培养基对放射性心脏损伤大鼠的心功能、炎症状态和心肌纤维化的影响目的:探讨心肌注射人脐带间充质干细胞条件培养基后,对放射性心脏损伤大鼠的心功能、炎症状态和心肌纤维化等情况的影响。方法:分离、培养人脐带间充质干细胞并收集条件培养基,SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、X射线照射组(Ir组)、X射线照射+对照培养基注射组(Ir+DMEM组)、X射线照射+人脐带间充质干细胞条件培养基注射组(Ir+MSCCM组)。饲养初期至照射后10周,超声心动图测定各组大鼠的心功能变化、血清学检测各组大鼠血清中炎症因子和心肌损伤标志物的表达含量、心肌组织HE和PSR染色观察各组大鼠心肌结构的变化、实时荧光定量PCR检测各组大鼠心肌组织中纤维化标志物的m RNA含量。结果:与对照培养基相比较,超声心动图结果显示人脐带间充质干细胞条件培养基心肌注射可显著改善放射性心脏损伤大鼠的左室射血分数和心肌肥厚程度;病理染色和实时荧光定量PCR结果也发现人脐带间充质干细胞条件培养基心肌注射可显著抑制放射性心脏损伤大鼠的心肌纤维化程度。此外,血清学检查发现人脐带间充质干细胞条件培养基心肌注射可显著降低放射性心脏损伤大鼠的炎症状态和心肌损伤程度。结论:人脐带间充质干细胞条件培养基心肌注射可减轻放射性心脏损伤大鼠的心肌损伤程度、炎症状态和心肌纤维化程度,从而促进放射性心脏损伤大鼠的心功能恢复。第二部分人脐带间充质干细胞条件培养基对照射后心脏的成纤维细胞活力、抗氧化能力、炎症状态和胶原蛋白合成的影响目的:探讨给予人脐带间充质干细胞条件培养基后,对X射线照射后心脏成纤细胞的活力、抗氧化能力、炎症状态和胶原蛋白合成的影响。方法:分离、培养并鉴定人脐带间充质干细胞,收集人脐带间充质干细胞条件培养基,将心脏成纤维细胞随机分为对照组(Control组)、X射线照射组(Ir组)、X射线照射+人脐带间充质干细胞条件培养基注射组(Ir+MSCCM组)。干预后CCK8测定照射后心脏成纤维细胞的细胞活性;细胞上清液检测照射后心脏成纤维细胞中MDA、总SOD、CAT和GPx的含量、实时荧光定量PCR检测照射后心脏成纤维细胞中抗氧化酶SOD1、SOD2、CAT和GPx的m RNA含量以期评价心脏成纤维细胞的抗氧化能力;ELISA试剂盒和实时荧光定量PCR联合检测照射后心脏成纤维细胞上清液和细胞中炎症因子IL-6、IL-8和IFN-γ的含量;最后,ELISA试剂盒和实时荧光定量PCR联合检测照射后心脏成纤维细胞上清液和细胞中胶原蛋白包括Col1A1和Col1A2的含量。结果:与照射组相比较,人脐带间充质干细胞条件培养基可明显降低照射诱导的心脏成纤维细胞的死亡数目,改善照射后心脏成纤维细胞的抗氧化应激能力,抑制照射后心脏成纤维细胞中促炎因子IL-6、IL-8的合成,抑制照射后促纤维化蛋白如TGF-β1、Col1A1和Col1A2的合成。结论:人脐带间充质干细胞条件培养基可显著改善照射后导致的心脏成纤维细胞的活力、抗氧化能力、炎症程度和胶原蛋白堆积情况。第三部分人脐带间充质干细胞条件培养基可能通过抑制NF-κB信号通路改善放射性心肌纤维化目的:体外细胞实验初步探讨人脐带间充质干细胞条件培养基改善放射性心肌纤维化的可能的作用机制。方法:分离、培养并鉴定人脐带间充质干细胞,收集人脐带间充质干细胞条件培养基,将心脏成纤维细胞随机分为对照组(Control组)、X射线照射组(Ir组)、X射线照射+人脐带间充质干细胞条件培养基注射组(Ir+MSCCM组)。检测各组心脏成纤维细胞中NF-κB p65的表达;然后,在X射线照射组细胞中给予NF-κB抑制剂,再次检测对照组、X射线对照组和X射线照射+NF-κB抑制剂组心脏成纤维细胞中TGF-β1的含量,进一步验证NF-κB信号通路是否真正影响照射后心脏成纤维细胞中促纤维化因子的合成,从而进一步影响放射性心肌纤维化。结果:与对照组比较,照射后心脏成纤维细胞中NF-κB信号通路被激活,给予NF-κB抑制剂处理,照射后心脏成纤维细胞中TGF-β1合成明显减少;而人脐带间充质干细胞条件培养基可显著抑制照射诱导后NF-κB信号通路的激活。结论:人脐带间充质干细胞条件培养基可能通过抑制NF-κB信号通路,增强照射后心脏成纤维细胞的活力,提高细胞的抗氧化能力,减少胶原蛋白的堆积,抑制细胞的炎症反应,从而能够进一步改善照射后诱导的心肌纤维化。