家畜胎盘肽的制备及其生物活性的研究

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免疫抑制是由各种因素影响,造成机体对抗原抵抗力下降甚至缺失的现象。无论在养殖行业还是人类,都存在病毒性免疫抑制和应用激素导致的免疫抑制现象,另外人类还存在放射治疗引起的免疫能力下降现象。故研究家畜胎盘肽的主要目的,是将家畜胎盘中丰富的生物活性物质,通过肽的形式传递给动物或人,以增强动物或人体的生物功能,从而探索出一种新型的免疫调节剂,充分利用动物胎盘。本实验室利用超滤法从牛、羊和猪胎盘中提取胎盘肽;采用改良的加脲Tricine-SDS-PAGE电泳法测定其相对分子量;利用紫外光扫描其最大吸收峰;并通过建立体外抑制兔淋巴细胞模型,利用MTT比色法测定所提取胎盘肽的免疫调节作用;用紫外光吸收法测定所提取胎盘肽的浓度。1实验结果证明,利用超滤法制备的家畜——牛、羊和猪胎盘肽为无色或微带黄色的透明液体,具有可透析性,可超滤性。2加脲Tricine-SDS-PAGE电泳电泳结果显示,牛和羊胎盘肽的相对分子量分别为4,785和4,386,与人胎盘肽的子量范围相符合(人的胎盘肽分子量小于5kDa)。而小于6kDa的猪胎盘肽的电泳带不是很清晰,但6kDa的那条电泳带却较明显。3利用紫外光扫描其最大吸收峰牛、羊和猪胎盘肽的紫外最高吸收峰分别为210.5nm、225.4nm和209.6nm,与刘士山等所测羊胚胎盘肽的最大吸收峰(194nm)和高利臣报道的羊胎盘肽的最高吸收峰在253±2nm处以及人胎盘肽的最大吸收峰(256nm)均不同。4利用紫外光吸收法测定所提取胎盘肽的含量所制备的牛、羊和猪胎盘肽的含量分别为6.27mg/ml、6.98 mg/ml和5.09mg/ml,不同于葛瑞宏等报道的测得羊胎盘肽含量(8.20mg/ml)和高利臣报道的羊胎盘肽含量(1.18±0.01mg/ml)。5利用MTT比色法测定所提取胎盘肽的免疫调节作用实验结果表明牛、羊和猪胎盘肽都可使兔处于抑制状态的淋巴细胞的转化率提高。其中牛胎盘肽以1:10~3、1:10~4两组效果显著(P<0.05),1:10、1:10~2两组吸光度低于抑制组,可能是由于胎盘肽浓度过高对于淋巴细胞
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