[目的]:从工业生产中的天麻素母液中,富集分离天麻素有关杂质,通过波谱分析确定杂质结构,然后通过酸碱水解方法探索天麻素杂质产生的规律,稳定得到天麻素杂质,为天麻素质量研究提供杂质对照品,便于今后控制天麻素产品杂质。[方法]:(1)通过柱层析探索天麻素母液杂质分离的方法,天麻素母液柱层析分离的方法为:Rf值0.5至0.7段的杂质用甲醇/二氯甲烷,0%-10%,0-20 min;10%-10%,20-50 min;10%-15%,50-60 min;15%-15%,60-100 min。Rf值0.7至0.9部分用乙酸乙酯/石油醚体系,0%-40%,0-20 min;40%,20-40 min;40%-60%,40-80 min。获得95%以上纯度的天麻素杂质。(2)通过红外光谱,质谱,核磁氢谱,核磁碳谱确定杂质的结构。(3)通过酸碱水解五乙酰基天麻素探索天麻素杂质的获取方法。[结果]:(1)从工业天麻素富集母液中分离获得了杂质1,杂质2,杂质3,杂质4,杂质5,等五个天麻素原料药杂质。(2)通过波谱分析确定了杂质1结构为:4-乙酰甲基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷;杂质2:4-乙酰甲基苯基-6’-O-乙酰-β-D-吡喃葡萄糖苷;杂质3:4-羟甲基苯基-2’,3’,4’,6’-四-O-乙酰-β-D-吡喃葡萄糖苷;杂质4:4-醛甲基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷;杂质5:对羟基苯甲醇。(3)筛选探索发现,用30 mg甲醇钠,与10 g五乙酰基天麻素在40 ml甲醇中反应可以稳定得到,杂质1,杂质2,杂质3。通过强制降解实验发现杂质4,杂质5为天麻素降解杂质。[结论]:从天麻素工业母液中获得了5个杂质,并通过波谱分析确定了天麻素有关杂质的结构,杂质1,杂质2,杂质3是天麻素生产中的工艺杂质,杂质4,杂质5是天麻素生产中的降解杂质。其中杂质1、杂质2为首次以天麻素工艺杂质形式报道的化合物。最后通过酸碱水解五乙酰基天麻素探索到了获取天麻素工艺杂质的方法。