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目的：建立Walker-256大鼠移植性肝癌模型后切除肿瘤并植入自制门静脉泵,经泵灌注不同剂量Licartin并联合灌注化疗(FOLFOX方案),评价这种联合用药方案的安全性、有效性和可行性,从而为这种新疗法的临床应用提供实验理论基础。材料与方法：选取雄性SD大鼠100只,将含有大量Walker-256中瘤细胞的浓缩腹水种植于大鼠肝脏的左外叶。一周后通过CT扫描,选取瘤体直径在2.0-3.0cm的大鼠,切除肿瘤后植入自制门静脉泵。7天后将存活大鼠随机分为A、B、C三组。A组(小剂量Licartin+PVIC组)：通过门静脉泵灌注Licartin (2.5mCi/kg)+灌注化疗(FOLFOX方案)；B组(大剂量Licartin+PVIC组)：通过泵灌注Licartin(5.0mCi/kg)+灌注化疗(FOLFOX方案)；C组(PVIC组)：通过泵行灌注化疗(FOLFOX方案)。每次手术前后均观察大鼠一般情况,抽血查血常规、肝肾功能和甲状腺功能。行CT扫描了解肿瘤生长和转移情况,A、B组行SPECT扫描检测核素分布情况。大鼠死亡后切取肝、肺和其他转移灶行病理学检查。观察所有大鼠生存资料进行生存分析。结果：本研究共进行了肝癌种植术、肝癌切除和门静脉泵植入术及经门静脉泵灌注术三次实验,术程基本顺利,麻醉满意,术后恢复情况良好。整个实验过程中大鼠体重呈现下降趋势。注射法种植肝癌简单易行,成瘤率为95.7%。切除肿瘤并植入门静脉泵后术后一周共46只大鼠行灌注术(其中A组18只,B组18只,C组10只)。灌注术后血常规检查提示术后7dA组和B组WBC计数明显降低,而且B组WBC计数又低于A组和C组(P=0.043),C组计数基本正常。术后14d计数均基本回归正常。RBC计数和PLT计数变化不大(P>0.05)。肝功能检查显示灌注术后Id AST和ALT计数都明显上升(P值分别是0.024和0.104),A组和B组计数高于C组,而且B组ALT计数还高于A组(P<0.001)。术后7d回落,AST下降趋势大于ALT。TBIL各组相比均无明显差异(P>0.05)。肾功能检查发现BUN和Cr计数在灌注术前后基本无大变化(P>0.05)。甲状腺功能检查发现A组和B组术后7d FT3、FT4计数明显低于术前(P值均<0.001),TSH明显高于术前(P<0.001),B组甲状腺功能损伤明显高于A组(P<0.001),至术后14d基本回落正常值。C组灌注术前后基本无异常(P>0.05)。术后5min SPECT扫描显示未见核素在肝脏内明显浓聚,甲状腺内富集大量核素。术后21d对于肿瘤明确复发的大鼠行SPECT扫描显示核素在肝肿瘤区域大量富集。肝癌种植术后一周行CT扫描发现63%的大鼠瘤体直径在2.0-3.0cm之间。灌注术后21d CT扫描发现B组复发和转移最少,A组次之,C组最多,但是分组治疗和TNM分期二者之间并没有关系(P=0.371)。病理学检查见肝肿瘤核分裂象增多,异型性明显,瘤细胞弥漫密集分布。免疫组化检查显示AFP阴性,CEA阴性,Hepa阴性,Glypican-3阴性(局灶±),Ki-67阳性(比例约40%)。所有大鼠都在灌注术后48天内死亡。生存状况分析显示三组大鼠的MST分别为27d、39d和24d,其中B组生存时间长于A组和C组(P<0.001)。肿瘤TNM分期和生存率存在关系,Ⅲ期、Ⅳ期的生存时间明显短于Ⅰ期和Ⅱ期(P值分别是0.005和0.000)。Cox回归分析显示B组的治疗是有利因素(βB=-1.604, RRB=0.201), C组的治疗是有害因素(βC=0.838,RRc=2.311)。结论：本研究通过Walker-256大鼠移植性肝癌模型,对经门静脉泵灌注Licartin联合门静脉灌注化疗(FOLFOX方案)这种联合治疗方案的安全性和有效性进行了评价。1.直接注射法建立Walker-256大鼠移植性肝癌模型成功率高且操作简单。2.联合治疗方案可有效提高大鼠肝癌术后的生存获益,尤其是对中晚期肝癌。3.联合治疗方案的不良反应主要是一过性的骨髓抑制和肝功能损伤,一般术后1-2周恢复正常。4.联合治疗方案的疗效要优于单用门静脉灌注化疗方案。5.大剂量(5.0mCi/kg)的联合治疗方案疗效要优于小剂量组(2.5mCi/kg),但不良反应亦要大于小剂量组综上所述,我们认为,经门静脉泵灌注Licartin联合门静脉灌注化疗(FOLFOX方案)这种联合治疗方案是防治肝癌术后复发和转移的一种安全、有效的新方法,值得进一步研究。