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【背景】冠心病(coronary artery heart disease,CHD)为严重威胁健康的主要疾病,伴随着冠脉内溶栓(thrombolytic therapy)和冠脉搭桥(coronary artery bypass graftsurgery,CABG)等治疗手段的广泛应用,继之出现的心肌缺血/再灌注(myocardialischemia/reperfusion,MI/R)损伤日益受到医药学家的高度关注。到目前为止,医药学家普遍认为:氧自由基释放、钙离子超载、炎症反应、细胞能量代谢障碍等为引起MI/R损伤的主要因素。因此,寻找能够减轻或者逆转以上致病因素的药物不失为一种防治MI/R损伤的策略。中药(traditional Chinese medicine,TCM)治疗MI/R损伤疗效确切、前景广阔。其中丹参(Radix Salvia miltiorrhiza)心肌保护作用的研究最为引人关注。现代药理学研究发现:丹参具有扩张冠状动脉、防止心肌缺血和心肌梗死、改善微循环、降低心肌耗氧量等作用,被广泛应用于临床心脑血管系统疾病的治疗。丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)是丹参的水溶性成分,常常以镁盐的形式存在,即丹酚酸B镁(magnesium lithospermate B,MLB)。有研究报道Sal B对大鼠MI/R损伤具有保护作用,但其作用机制尚不明确。为了进一步研究其治病机理,立项本实验,研究Sal B对MI/R损伤的保护作用及作用机制。【目的】1)构建SD大鼠MI/R损伤模型,研究Sal B对MI/R的保护作用及其机制。2)构建H9c2心肌细胞SI/R损伤模型,研究Sal B对SI/R的保护作用及其机制。【方法】第一部分:采用结扎冠状动脉复制大鼠MI/R(30min/3h)损伤模型。1)心功能检测指标:LVSP、LVEDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax;2)心肌损伤血清生化指标:cTnI、CK-MB;3)抗氧化血清生化指标:SOD、MDA;4)抗炎血清生化指标:IL-1、IL-6、TNF-α;5) Evan Blue&TTC染法评价大鼠心肌梗死面积:RZ(%)、IZ(%);6) Hematoxylin&Eosin染色分析心肌组织病理改变;7)心肌组织酶的表达:SOD、MPO;8) Western blot检测:Nrf2、NF-κB。第二部分:采用H9c2心肌细胞模拟缺血/再灌注(Simulated ischemia/reperfusion,SI/R,2h/24h)损伤模型。1) H9c2心肌细胞存活率:MTT;2)细胞损伤相关酶检测:CK-MB、LDH;3)细胞凋亡检测:Annexin V-FITC/PI、Hoechest33258;4) Western blot检测:Akt、e-NOS。【结果】第一部分:揭示MLB可以改善MI/R损伤大鼠心功能;抑制心肌损伤酶cTnI、CK-MB的合成与释放;降低超氧化物歧化酶SOD的活力,同时减少脂质过氧化产物MDA的含量;抑制血清中炎症因子IL-1、IL-6及TNF-α的释放。MLB能够显著降低大鼠心肌梗死面积,逆转心肌组织的病理学改变,升高心肌组织当中的SOD活力,降低MPO的活力,同时抑制心肌组织中NF-κB的表达,升高Nrf2的表达。第二部分:MLB提高了H9c2心肌细胞活力,降低了细胞上清中CK-MB、LDH的释放,抑制了H9c2心肌细胞凋亡,同时显著升高p-Akt、p-eNOS的表达。【结论】证实了Sal B具有防治MI/R损伤的心肌保护作用,这种保护作用与其显著的抗炎、抗氧化、抗凋亡作用相关。