昆虫病原线虫(Entomopathogenic nematode)的基因与模式线虫秀丽隐杆线虫Caenorhabdits elegans存在很高的同源性。然而,研究寄生线虫的基因功能仅靠借助C.elegans的研究结果远远不够,尤其是在阐明寄生虫与宿主之间的共生关系的机制方面。因此迫切需要建立昆虫病原线虫的功能基因研究技术。本研究以小卷蛾斯氏线虫为研究对象,利用大肠杆菌饲喂的方法对小卷蛾斯氏线虫che-11基因进行了 RNAI研究,为昆虫病原线虫基因功能研究提供了一种新的技术方法。本研究所取得的主要结论如下:(1)利用大肠杆菌HT115在90mm直径培养基上培养线虫时,线虫的最佳接种量为500IJ/皿,其接种代线虫恢复率为80%以上,培养20d线虫产量为4037IJ/皿,收获的侵染期线虫整齐度为92%以上。在NGM培养基中添加50 mg/L的Amp或0.4mM的IPTG或50 mg/L的Amp+0.4mM的IPTG,对线虫的繁殖无影响。(2)本研究通过分析其他线虫的che-11基因保守区序列,设计简并引物PCR扩增获得小卷蛾斯氏线虫che-11基因的同源片段,并将特异片段重组到L4440干扰载体获得L4440-che-11重组质粒,转化大肠杆菌HT115菌株,获得che-11基因的RNAi表达菌株。(3)通过饲喂che-11基因RNAi表达菌株获取小卷蛾斯氏线虫,对收获的线虫che-11基因表达量进行SYBR-Green实时荧光定量PCR验证,线虫的che-11基因表达下调了 0.63倍。表明昆虫病原线虫的RNAi饲喂技术具有干扰效果。