【摘 要】
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犬髌骨脱位是犬常见的一种疾病,严重影响犬的正常生活。滑车沟再造术是临床上髌骨脱位基本且常用的手术治疗方法。然而其破坏软骨层的操作严重影响病犬的术后恢复,会引起过度疼痛反应及术后感染。因此滑车沟再造术术后如何减少炎症和疼痛反应,促进软骨及骨组织的修复是术后恢复需要优化的方面。富血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP)技术是通过自体血离心制备高浓度血小板血浆的技术。血浆中的血小板
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犬髌骨脱位是犬常见的一种疾病,严重影响犬的正常生活。滑车沟再造术是临床上髌骨脱位基本且常用的手术治疗方法。然而其破坏软骨层的操作严重影响病犬的术后恢复,会引起过度疼痛反应及术后感染。因此滑车沟再造术术后如何减少炎症和疼痛反应,促进软骨及骨组织的修复是术后恢复需要优化的方面。富血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP)技术是通过自体血离心制备高浓度血小板血浆的技术。血浆中的血小板可以起到组织修复、调节炎症和免疫反应的作用。PRP作为自源性提取物避免排斥反应,具有来源丰富、操作简便、价格低廉的优点对于动物治疗上有很大的应用前景。本试验通过实验犬自体血制备富血小板血浆,滑车沟再造术后膝内注射PRP试验。对宠物临床PRP制备的可能性进行探讨,同时验证PRP对于滑车沟再造术术后减少炎症疼痛、预防感染、促进软骨修复起到积极作用。试验内容:(1)PRP制备及成分分析:采用单次凝胶离心法,制备富血小板血浆,制备前后对全血及PRP进行血常规对血小板(platelet,PLT)、白细胞(white blood cell,WBC)计数并计算富集系数、回收率,验证该方法制备PRP是否满足标准,并论证是否能有效应用宠物临床中;(2)PRP在犬滑车沟再造术后损伤修复中的应用检测:通过术后膝关节注射PRP,1周注射1次,持续3周。术前术后持续7 d进行膝关节评分,术前术后持续5 d进行血常规炎症细胞计数,术后4周进行影像学CT检查,术后12周、16周进行组织学检查通过大体肉眼及切片观察和评分。验证PRP对于滑车沟重塑术后控制炎症、减少疼痛、促进软骨修复是否有积极作用。试验结果:(1)实验犬采取全血3 mL,全血与抗凝剂枸橼酸钠比例6:1,在凝胶抗凝管中中速3600 rpm离心5 min,抽取上层血清,震荡混匀5 min,制备0.2 mL PRP。PRP中血小板浓度为1532.08±215.29 x109/L、富集系数6.08±0.53满足PRP成分要求;(2)PRP在犬滑车沟再造术后损伤修复中的应用检测结果:膝关节评分结果:与对照组相比,实验组在T1-T7膝关节评分均差异显著(p<0.05),且每个时间点分数低于对照组;实验室血常规检测白细胞计数与中性粒细胞计数,实验组对比对照组在时间点T1～T5数值差异显著(p<0.05),各时间点数值均小于对照组;影像学检查:高频超声及CT观察4周后,实验组滑车沟软骨面连续性优于对照组;大体观察及评分结果:同一时间点实验组和对照组与正常软骨组织相比均有不同程度的磨损和软骨下出血,实验组情况优于对照组。大体肉眼评分实验组、对照组软骨组织评分12周、16周分数有显著差异(p<0.05),实验组评分大于对照组。组织学观察评分结果:同一时间点实验组对比软骨厚度、基质易染性及软骨细胞数量都优于对照组。组织学评分实验组、对照组软骨组织评分12周、16周分数有显著差异(p<0.05),实验组评分小于软骨组织,16周实验组与正常软骨组织学评分存在显著差异(p<0.05)。综合以上试验结果得出:(1)临床制备PRP抽取自体血采用单次凝胶离心法,制备血小板富集系数为6.08±0.53,符合有效浓度。因其制备方法简单,抽血量提取量满足临床需要,所以在宠物临床有一定的应用前景;(2)犬滑车沟再造术后膝内注射PRP,时间间隔1周持续3周,对于术后减轻炎症、控制疼痛、促进软骨修复有明显作用。
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