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于鼻间隔嗅基板区域,沿着犁鼻神经纤维迁移到筛板,然后穿过筛板绕过嗅球,最终迁移至前脑部位分泌GnRH激素。这种激素是生殖轴重要的脑部调节因子,在调节垂体-性腺轴的功能中发挥着很关键的作用。因此GnRH神经细胞迁移至正确位置,对脊椎动物生殖系统的发育及生殖功能的发挥非常重要。Myo X(Myosin X)分子作为一种非传统形式的肌球蛋白,在丝足形成、细胞迁移、细胞粘附及极性建立等过程中都发挥着重要作用。实验室前期工作已经证明沉默Myo X的表达会引起细胞极性的丧失。已有研究表明Myo X通过FERM结构域与血管内皮细胞钙粘附蛋白(VE-Cadherin)相互作用,携带VE-Cadherin沿着丝足运动,从而促进早期细胞间连接的建立。N-Cadherin是跨膜糖蛋白的钙粘素家族的重要成员之一,与VE-Cadherin具有高度的同源性。N-Cadherin是表达于神经系统的钙粘附蛋白,推测N-Cadherin可能具有与VE-Cadherin相似的功能,通过与Myo X相互作用,在神经细胞粘附形成和极性建立中发挥着重要作用。实验中通过免疫共沉淀证明Myo X可通过尾部区与N-Cadherin相互作用;然后沉默Myo X在NLT细胞系中的表达,导致细胞粘着斑密度由0.097±0.00021个/μm2降低密度为0.052±0.00017个/μm2;利用‘stick and wash’方法也检测到细胞与基质间粘附能力降低;同时F-actin的密度也由0.0043±0.00012个/μm2降低为0.0027±0.00015个/μm2,说明细胞骨架的稳定性受到影响;通过Real time PCR分析发现,沉默Myo X导致N-Cadherin的转录水平下降为正常水平的52.40%,Western blot分析表明蛋白表达也受到抑制;细胞团分析表明,正常情况下,细胞团周围细胞迁移总数和辐射状迁移细胞数目分别为117±20.5841个和115±20.4134个,而Myo X沉默后,迁移总数和辐射状迁移细胞分别降为94±13.6651个和90±13.3416个,N-Cadherin的过表达又分别使之提高为111±14.3858个和109±14.5428个;同时Myo X也影响细胞迁移距离,沉默Myo X使细胞团周围细胞的平均迁移距离由正常水平的158±15.7011μm降低为109±36.1012μm,而过表达N-Cadherin使细胞平均迁移距离恢复为170±10.3982μm。总之,结果表明Myo X与N-Cadherin相互作用,调节GnRH神经细胞的正确迁移,为进一步阐明GnRH神经细胞迁移机制提供了一些理论依据。