论文部分内容阅读
目的:探讨孕酮(Progesterone,P)和米非司酮(Mifepristone,RU486)联合对子宫内膜癌细胞增殖抑制和凋亡的影响,为临床治疗子宫内膜癌提供新方案。方法:1、体外培养子宫内膜癌细胞株HHUA。2、采用MTT方法检测并绘制孕酮及米非司酮对HHUA细胞株的生长曲线,分别计算两种药物的IC10和IC50值。3、应用MTT方法检测对照组、两种药物不同联合浓度(P IC10、RU486 IC10、P IC10+RU486 IC10、P IC50、RU486 IC50、P IC10+RU486 IC50、P IC50+RU486 IC10、P IC50+RU486 IC50)干预24h、36h、48h吸光度值,计算细胞抑制率。4、利用RT-PCR技术与免疫细胞化学方法分别检测两种药物不同浓度(P IC10、RU486 IC10、P IC10+RU486 IC10、P IC50、RU486 IC50、P IC10+RU486 IC50、P IC50+RU486 IC10、P IC50+RU486 IC50)干预48小时后Bcl-2、Fas基因在转录及翻译水平的表达,并与对照组进行比较。结果:1、MTT绘制细胞生长曲线结果显示:孕酮和米非司酮作用于细胞的生长曲线均呈S形,孕酮IC10:13.0547umol/l、IC50:91.5584umol/l,米非司酮IC10:7.5604umol/l、IC50:37.8352umol/l。2、MTT增殖实验结果显示:孕酮和米非司酮联合用药组比各单用药组子宫内膜癌细胞抑制率高,48小时内药物作用呈时间依赖性。不同浓度联合用药组与各单用药组之间均有差异(P<0.05)。3、免疫细胞化学结果显示不同浓度孕酮和米非司酮培养的子宫内膜癌细胞与对照组比较,及联合用药组与各单用药组相比,Bcl-2表达减弱,Fas表达增强,统计学差异显著(P<0.05)。4、RT-PCR结果显示不同浓度孕酮和米非司酮培养的子宫内膜癌细胞与对照组比较,及联合用药组与各单用药组相比,Bcl-2 mRNA表达减弱,Fas mRNA表达增强,统计学差异显著(P<0.05)。结论:1、孕酮和米非司酮均能有效抑制人子宫内膜癌HHUA细胞株体外增殖,72小时内呈浓度依赖性。2、孕酮和米非司酮联合对人子宫内膜癌HHUA细胞株的抑制增殖有协同作用,且高浓度组作用强于低浓度组。3、免疫细胞化学和RT-PCR结果,分析子宫内膜癌HHUA细胞株在孕酮和米非司酮联合干预后Bcl-2表达下调,Fas表达升高,表明孕酮和米非司酮可能通过调节凋亡因子的表达,诱导肿瘤细胞的凋亡,实现对子宫内膜癌细胞的生长抑制作用。4、孕酮和米非司酮可协同抑制子宫内膜癌细胞增殖,促进细胞凋亡,提高抗肿瘤效应,作用机制可能涉及基因和蛋白的不同水平。