灰霉菌（Botrytis cinerea）是一种以空气传播为主的腐生营养型植物病原体,其寄主包括草莓、葡萄、黄瓜等1000余种植物,危害范围遍布全球,因此它已成为研究腐生营养型病原菌的重要模式物种。植物对病原菌的防御响应是一个复杂的生物学过程,涉及到生物化学、分子（即转录）和生理水平等的各种变化。在病原菌侵染的过程中,植物能够通过产生小的信号分子和激素信号途径之间的平衡来激活信号网络,从而启动对特定病原菌的防御。我们之前的研究结果表明在灰霉菌侵染24 h和48 h的拟南芥叶片中细胞分裂素氧化酶基因CKX5的转录水平显著提高,表明CKX5可能参与了植物对灰霉菌的防御反应过程。在此基础之上,本文旨在通过酵母单杂交筛选拟南芥响应灰霉菌侵染过程中调控CKX5表达的转录因子并对其进行验证。主要研究结果如下:1.为进一步证实CKX5在拟南芥与灰霉菌互作中的作用,对CKX5过表达的拟南芥植株进行鉴定,并对其进行了灰霉菌孢子接种实验。结果显示,与野生型植株相比,CKX5过表达的转基因拟南芥植株对于灰霉菌侵染的抗性更强。2.结合拟南芥转录因子文库,运用酵母单杂交和酵母点对点验证实验筛选并获得了一批与CKX5启动子存在潜在相互作用的转录因子,包括WRKY40、WRKY33、ERF6、AHL15、AHL17、SPL3和BBX14等。通过q RT-PCR证实了在灰霉菌侵染的叶片中以上转录因子的表达水平均受到显著调控。对WRKY40、WRKY33和SPL3这三个转录因子在CKX5启动子序列上的潜在结合位点进行多点突变,并通过酵母点对点验证了这三个转录因子与CKX5启动子是通过特定的序列结合的。3.灰霉菌侵染ERF6、AHL15缺失突变体植株以及ERF6过表达植株,结果表明与野生型植株相比,erf6和ahl5突变体对灰霉菌更敏感,ERF6过表达植株对灰霉菌的抗性更强。通过对转录因子突变体对灰霉菌的敏感性分析以及灰霉菌侵染过程中CKX5表达模式变化发现ERF6和AHL15均可以调控CKX5的表达,但二者可能不是灰霉菌侵染诱导的CKX5高水平表达的主要调控因子。本研究通过酵母单杂交的方法筛选了灰霉菌侵染过程中调控CKX5高量表达的上游转录因子并对其进行进一步验证,探究CKX5在植物响应灰霉菌过程中发挥的作用,进一步探索了细胞分裂素调控植物防御灰霉菌侵染的分子机制,为防治灰霉菌提供理论依据,同时为抗病育种提供靶标。