猫爪草提取物抗人非小细胞肺癌作用及对EGFR、MMP-9表达的影响

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目的:本实验研究旨在观察猫爪草提取物抗人非小细胞肺癌作用,探究其可能的作用机制,为猫爪草提取物治疗非小细胞肺癌提供理论和实验依据。方法:①采用系统溶剂法提取猫爪草总皂苷、粗多糖。②采用3H-TdR掺入法观察猫爪草提取物体外对人非小细胞肺癌细胞增殖的影响。③采用流式细胞仪检测猫爪草总皂苷对人非小细胞肺癌细胞周期与凋亡的影响。④采用人非小细胞肺癌A549裸鼠移植瘤模型,观察猫爪草总皂苷对人非小细胞肺癌的抑制作用。⑤采用免疫组化法观察猫爪草总皂苷对人非小细胞肺癌A549移植瘤组织EGFR、MMP-9表达的影响。结果:①采用系统溶剂法提取猫爪草总皂苷和粗多糖,经检测总皂苷含量为52%,粗多糖含量为85%。②体外实验证明,猫爪草总皂苷对人非小细胞肺癌A549细胞和NCI-H460细胞的增殖均有较好的抑制作用,呈现较好的量效关系,作用48h后计算IC50值分别为44.3±11.2μg/ml和120.8±20.6μg/ml,粗多糖对人非小细胞肺癌A549细胞和NCI-H460细胞有较弱的抑制作用,表明总皂苷可能是猫爪草抗肿瘤的有效组份。③采用流式细胞术观察到猫爪草总皂苷可促进A549细胞和NCI-H460细胞的早期凋亡,细胞周期均出现G0/G1期的阻滞。④在A549裸小鼠移植瘤模型中,给药18天后,猫爪草皂苷1.73g/kg剂量组的抑瘤率达到了32.6%,瘤重与阴性对照组比较差异显著(P<0.05)。结果表明猫爪草总皂苷对A549裸鼠移植瘤的生长具有较好的抑制作用。⑤免疫组化结果表明:猫爪草总皂苷各剂量组的EGFR、MMP-9阳性表达率与水对照组相比有所降低,且呈剂量依赖性,其中高剂量组的EGFR阳性表达率与水对照组相比差异显著(P<0.05)。结论:本实验初步表明中药猫爪草总皂苷体外能较好的抑制非小细胞肺癌细胞的增殖,体内可有效抑制人非小细胞肺癌A549裸鼠移植瘤的生长。其抗肿瘤作用机制可能与引起肿瘤细胞周期阻滞、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制EGFR蛋白表达从而减少肿瘤细胞的增殖、抑制MMP-9蛋白表达而抑制肿瘤侵袭转移等有关。
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