抗菌肽是免疫系统对抗自然界微生物侵袭的一种基本防御物质,已成为当前各国研究的热点。为探讨肠道抗菌肽的生物学活性和对动物免疫系统的影响,本实验从鸡、鸭肠黏膜中提取抗菌肽,研究各种理化因素对其抑菌活性的影响,及其对淋巴细胞体外转化增殖的影响,并将抗菌肽添加到动物饮水中研究其对淋巴细胞的体内转化增殖、动物体重和免疫器官指数的影响。具体内容和结果如下:1.肠道抗菌肽的分离提取本实验采用乙酸浸提法从鸡、鸭肠黏膜中提取抗菌肽,通过对大肠杆菌的抑菌作用检测每步产物的活性,经Sephadex G-50凝胶过滤层析,有抑菌活性的洗脱产物经SDS-PAGE纯化,测定其分子量分别为6.078kD和6.095kD。通过分析,提取出来的物质符合抗菌肽类物质的理化特性,应为抗菌肽类物质。2.各种理化因素对抗菌肽抑菌活性的影响以未经热处理的抗菌肽的抑菌活性为参照,鸡、鸭肠道抗菌肽经不同温度处理后的抑菌活性结果表明,在40℃-80℃条件下处理20min其抑菌活性变化不大,90℃以上处理后抑菌活性有所下降,说明肠道抗菌肽具有一定的耐热性。鸡、鸭肠道抗菌肽的抑菌活性对pH值的变化较敏感,在pH6-8的环境中抑菌活性较强,在pH5和pH9的环境中抑菌活性较差。3.抗菌肽对淋巴细胞转化增殖的影响体外培养雏鸡、雏鸭外周血淋巴细胞,运用MTT法观察不同浓度的肠道抗菌肽单独和与PHA-P/LPS共同作用时对淋巴细胞体外转化增殖的影响,结果显示鸡、鸭肠道抗菌肽均能够单独刺激淋巴细胞的转化增殖;与PHA-P/LPS共同刺激时低浓度能促进淋巴细胞的转化增殖,当浓度过高时能降低PHA-P/LPS单独刺激的淋巴细胞转化增殖的作用。通过在饮水中添加肠道抗菌肽,研究其对不同日龄的雏鸡、雏鸭淋巴细胞体内转化增殖的影响,结果显示鸡、鸭肠道抗菌肽对淋巴细胞体内转化增殖的影响不显著。4.抗菌肽对动物体重和免疫器官指数的影响通过在饮水中添加肠道抗菌肽研究其对实验动物体重和免疫器官指数的影响发现,肠道抗菌肽对雏鸡、雏鸭的体重和免疫器官指数都无明显的影响。以上研究表明:本实验从鸡、鸭肠黏膜中成功提取出抗菌肽;该肠道抗菌肽耐热性比较好,但是对pH的变化比较敏感,在pH值近中性的环境中抑菌活性较强;该抗菌肽能够单独刺激淋巴细胞的体外转化增殖,在低浓度时能促进PHA-P/LPS刺激的淋巴细胞体外转化增殖;动物实验结果表明该抗菌肽对淋巴细胞的体内转化增殖和对动物体重及免疫器官指数的影响都不显著。本论文的研究为抗菌肽在畜牧业上的开发与应用提供了一定的研究基础。