补骨脂,为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia Linn.的干燥成熟果实,是历史悠久的传统药,具有补肾助阳、纳气平喘、温脾止泻、固精缩尿的功效。补骨脂香豆素类和萜酚类化合物具有肝脏、肾脏毒性。补骨脂黄酮类化合物作为其活性成分之一被发现具有多种的药理作用。经课题组前期研究发现,补骨脂二氢黄酮甲醚(BVC),作为新型、天然的PPARs多重激动剂,有助于脂质代谢和碳水化合物的代谢调节。除BVC外,部分黄酮类化合物对PPAR-α/γ也有激动活性,提示可能具有协同作用,进而共同调节糖脂代谢。目的:通过对补骨脂总黄酮的提取和富集,制备补骨脂总黄酮的有效部位。研究补骨脂总黄酮对高脂餐诱导肥胖小鼠改善糖脂代谢的影响,并对其增加白色脂肪棕色化机制进行探索。方法:采用了硅胶柱和聚酰胺柱法制备补骨脂总黄酮,除去补骨脂酚和香豆素类成分;利用C57BL/6小鼠高脂餐诱导肥胖模型,掺饲料给药补骨脂总黄酮0.2%或0.5%(w/w)持续12周,研究对体重、血糖、肝脏脂肪变性和能量代谢等糖脂代谢相关的影响。体外利用3T3-L1前体脂肪细胞诱导分化模型和C3H10T1/2间充质干细胞诱导分化模型,研究补骨脂总黄酮对脂肪细胞分化和褐变的机制。结果:硅胶柱和聚酰胺柱法均能有效除去补骨脂香豆素成分(补骨脂素、异补骨脂素)和补骨脂酚,并保留补骨脂总黄酮有效成分,补骨脂总黄酮的含量分别为50.1%和48.7%。在体内药效学研究中,补骨脂总黄酮剂量依赖性地降低DIO小鼠体重和脂肪重量,增加耗氧量和二氧化碳生成量,增加能量代谢。补骨脂总黄酮能够缓解DIO小鼠的胰岛素抵抗状态并改善糖耐量,提高胰岛素敏感性,促进肝脏对糖的利用,但不影响肝脏糖异生相关基因的表达。同时,补骨脂总黄酮显著降低肝脏总胆固醇、甘油三酯含量,并减少肝脏的空泡样变和脂滴的堆积,通过增加肝脏脂质氧化和分泌进一步改善肝脏脂肪变性的发生。此外,补骨脂总黄酮能诱导皮下白色脂肪棕色化的发生,增加棕色脂肪产热,可能是通过AMPK 1/2和p38的信号通路。在体外3T3-L1细胞和C3H10T1/2细胞诱导分化模型中,补骨脂总黄酮能增加白色脂肪棕色化的表达。结论:硅胶柱和聚酰胺柱法可以有效富集补骨脂总黄酮;制备得到的补骨脂总黄酮能显著抑制小鼠体重的增长幅度,改善葡萄糖稳态,预防肝脏脂肪变性的发生,具有减肥作用。同时,补骨脂总黄酮能够增加小鼠能量代谢水平,诱导UCP1表达并促进皮下脂肪和棕色脂肪产热,可能与激活AMPK及P38的磷酸化有关。