目的:制备出负载不同浓度梓醇(catalpol)的静电纺丝载药支架,研究不同浓度梓醇对静电纺丝纤维的微观形貌、直径分布、孔隙率和干湿两种条件下力学性能方面的影响,以及负载的梓醇在不同时间点的释放情况,并观察梓醇静电纺丝载药纤维支架对脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)的神经向诱导分化作用。方法:本实验主要分为三大部分:(1)选取已经确定的混纺静电纺丝纤维的各种成分的质量体积分数:聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)为15%(w/v)、丝素蛋白(SF)为10%(w/v)、多壁碳纳米管(multi-walled carbon nanotubes,MWCNTs)为0.2%(w/v),再加入不同质量的梓醇制备成含梓醇质量体积比为1、2、3、4、5mg/ml(w/v)的载药电纺纤维(实验组)。不含有梓醇的静电纺纤维作为对照组。利用扫描电镜观察电纺纤维的表观形貌,运用红外图谱分析梓醇与混合物之间的作用,通过X射线衍射分析梓醇对电纺纤维的化学影响。(2)利用Image J软件计算电纺纤维的直径,比较不同浓度梓醇下纤维直径分布情况;利用Origin软件对电纺纤维的孔隙率进行分析;将材料在力学检测仪上进行检测,评价不同浓度梓醇电纺纤维的杨氏模量、极限应变、屈服强度指标;利用高效液相色谱仪分析载药纤维中梓醇在不同的时间点的释放情况。(3)将脂肪干细胞分别接种到实验组和对照组,并把平板培养的脂肪干细胞作为平板培养组(TCP组)。在3天和5天两个时间点分别进行Hoechst33258细胞核染色和βIII-tubulin、Nissl免疫荧光复合染色,并计数βIII-tubulin、Nissl阳性细胞比例,观察不同实验组间及对照组在不同时间点ASCs的神经向分化情况。在诱导3天时将细胞消化下来,利用Real-time PCR和Western blot检测诱导细胞内的βIII-tubulin基因表达情况。结果:1.成功将不同浓度梓醇通过静电纺丝方法制成混纺载药纤维,纤维表面基本光滑,无串珠和表面颗粒出现;梓醇与聚合物成份只是物理的混合,没有发生化学作用。2.对载药纳米纤维的直径、孔隙率和力学结果研究表明,加入梓醇后纤维直径变细,而孔隙率则增大,并且其力学性能也得到增强,其中4mg/ml浓度组较其它组的综合性能更加优良;3.通过药物释放行为检测,表明混纺梓醇电纺纤维支架能够在一定时间内持续释放梓醇,但出现初始暴释现象;4.不同浓度的梓醇载药电纺纤维支架具有诱导ASCs神经向分化的作用,细胞免疫荧光染色、RT-PCR检测和Western blot检测都表明,梓醇浓度在4mg/ml组时诱导效果最明显。结论:将天然中药成分梓醇作为负载药物,与聚合物混纺,能够成功制备出不同浓度载药电纺纤维,且不影响梓醇药物活性,释放出的梓醇能够诱导脂肪间充质干细胞向神经向分化(βIII-tubulin、Nissl表达阳性),研究证实利用梓醇负载的纳米纤维支架可构建出一个三维条件下定向诱导干细胞神经向分化的药物释放体系。