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乳腺癌近20年来发病率呈明显上升的趋势。乳腺癌是一种雌激素依赖性肿瘤,目前公认雌激素通过和受体的结合介导的细胞信号在乳腺癌发生、发展中具有重要作用。雌激素受体分α和β两种。既往研究表明ERβ(Estrogen receptorβ)是肿瘤的抑癌基因,但其作用机制至今仍不清楚。目的:本研究目的是试图通过酵母双杂交筛选人类基因中与ERβ1有相互作用的蛋白,研究ERβ与相互作用蛋白结合的意义,为进一步研究ERβ的生物学功能奠定基础。研究方法:第一部分用酵母双杂交筛选人类基因cDNA文库中与ERβ1-LBD结构域相互作用关系的未知蛋白;第二部分用哺乳动物双杂交系统确认两蛋白之间相互作用的结构域及雌激素对该作用的影响;第三部分采用强制表达和基因沉默技术以及报告基因分析等分子生物学技术分析ERβ与相互作用蛋白结合的生物学效应及其在人乳腺癌细胞的生物学意义。研究结果:酵母双杂交结果发现ERβ1与分化抑制因子1(inhititory difference-1, Id1)之间存在着相互作用的效应,经免疫共沉淀等多种方法证明ERβ1—Id1间确实存在相互作用关系。在哺乳动物双杂交系统中我们不仅再次证实ERβ1—Id1间存在相互作用,而且还证明Id1的HLH结构域与ERβ1的LBD结构域是相互作用的关键结构域。证明雌激素能干扰ERβ1—Id1之间的相互作用。在第三部分中证实ERβ1对乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖具有明显的抑制作用,这种增殖抑制与ERβ1上调p21、p16等抑制细胞增殖的基因有关。在p21基因启动子活性分析的研究中证明ERβ1上调p21基因表达的作用具有Id1依赖性;发现ERβ1—Id1信号通路可参与抑制乳腺癌细胞增殖机制。结论:发现了ERβ1新的相互作用蛋白Id1,ERβ1—Id1相互作用的结构域是ERβ1的LBD与Id1的HLH结构域。ERβ1—Id1间的相互作用受雌激素干扰。ERβ1—Id1信号通路的基本生物学作用是抑制乳腺癌细胞增殖,其抑制增殖的分子机制是上调p21基因的表达,并且ERβ1上调表达具有Id1依赖性。