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目的:采用大脑中动脉栓塞法（Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO）建立脑缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury,I/R）模型,观察益气通络颗粒（Yiqi Tongluo granule,YQTLG）对I/R模型大鼠神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织形态学、海马神经元超微结构、脑血流量及钙离子的影响,探讨其保护作用;并对脑缺血再灌注损伤大鼠纹状体中谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GABA）的水平进行检测,以及其相关反应的蛋白ERK、p-ERK、NR2B、p-CAMKⅡ表达的影响,初步探讨探讨其作用机制,为临床治疗脑卒中提供实验数据和理论基础。方法:1.益气通络颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用（1）采用MCAO建立脑缺血2h再灌注24h模型,并选用Longa五级四分制评分法进行神经功能缺损评分,筛选模型成功大鼠用于实验;并对给药第1d、第7d、14d后各组大鼠进行评分。（2）激光多普勒血流仪（Laser Doppler flowmetry,LDF）监测脑缺血再灌注过程中血流量的变化。并对给药第1d、第7d、14d后各组大鼠的脑血流量进行检测。（3）氯化三苯四唑（2,3,5-three phenyl tetrazole chloride,TTC）染色法测定益气通络颗粒对I/R大鼠脑梗死体积的影响。（4）苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin staining,HE）法观察益气通络颗粒对I/R大鼠海马区形态学结构的影响。（5）通过透射电镜（Transmission electron microscope,TEM）观察益气通络颗粒对I/R大鼠缺血侧海马CA1区神经元超微结构的影响。（6）采用流式细胞仪技术观察益气通络颗粒对I/R大鼠缺血侧海马组织中钙离子浓度的影响。2.益气通络颗粒对局灶性I/R大鼠保护作用的机制研究（1）采用微透析技术检测益气通络颗粒对I/R大鼠大脑纹状体中细胞外液Glu、GABA水平的影响。（2）Western Blotting法检测益气通络颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠海马中p-ERK、ERK表达的影响。（3）蛋白质免疫印迹法（Western Blotting,WB）检测益气通络颗粒对I/R大鼠缺血侧海马组织中p-Ca MKⅡ表达的影响。（4）蛋白质免疫印迹法检测益气通络颗粒对I/R大鼠缺血侧海马组织中谷氨酸受体NR2B表达的影响。结果:1.益气通络颗粒对I/R大鼠的保护作用（1）行为学功能缺损评分结果显示,给予益气通络颗粒7天,14天后,功能缺损分值显著低于模型组,表明益气通络颗粒可降低神经功能缺损评分,具有改善神经功能缺损的作用。（2）脑血流量检测结果显示:灌胃给药第7d,14d天,益气通络颗粒组与模型组比较,局部脑血流量有显著性差异（P<0.01）,提示益气通络颗粒可以升高模型大鼠脑血流量。（3）TTC染色结果:与模型组相比,益气通络颗粒可以显著减少梗死体积（P<0.01）,尤其Yx剂量组作用效果显著,具有统计学意义。（4）HE染色结果表明,假手术组大鼠细胞核完整,结构清晰排列有序,模型组大鼠组织结构疏松,细胞肿胀,呈现明显的脑水肿现象。给药14d后,益气通络颗粒能够显著改善细胞形态损伤。（5）电镜结果显示:假手术组大鼠海马CA1区神经元细胞有完整的细胞核,组织结构排列紧密清晰有序。模型组细胞边缘空泡化,粗面内质网断裂。经再灌注给药治疗14d后,与模型组比较,益气通络颗粒组大鼠细胞损伤情况得到显著改善,核仁明显,结构完整等,提示益气通络颗粒可显著改善神经元的损伤情况。（6）流式细胞仪检测（Flow cytometer,FCM）钙离子结果显示:模型组大鼠海马区钙离子水平显著高于假手术组,给药14天后,益气通络颗粒可降低钙离子水平,改善了因钙离子大量内流而引起的细胞损伤情况。2.益气通络颗粒对局灶性I/R大鼠保护作用的机制研究（1）微透析技术检测氨基酸:模型组大鼠缺血侧纹状体中Glu和抑GABA水平显著高于假手术组,而提前给予益气通络颗粒可降低Glu所造成的神经毒性,同时促进GABA水平的升高抵消兴奋性损伤（P<0.05,P<0.01）,使其恢复两者平衡的情况。（2）Western Blotting法检测p-ERK、ERK结果表明:与模型组比较,益气通络颗粒能够抑制p-ERK活化程度及其表达率,从而减轻脑缺血损伤,而ERK在整个缺血过程中几乎没有明显变化。（3）Western Blotting法检测p-CAMKⅡ结果显示:同假手术组相比,I/R大鼠海马中CAMKⅡ迅速磷酸化,p-CAMKⅡ水平显著上升（P<0.01）,预防给予益气通络颗粒能够降低缺血过程中p-CAMKⅡ水平的表达。（4）Western Blotting法检测NR2B结果显示:与假手术组相比较,I/R大鼠海马中组织中NR2B水平显著升高（P<0.01）,预防给予益气通络颗粒组可不同程度降低I/R模型大鼠NR2B的表达（P<0.01）,减轻脑缺血损伤。结论:1.益气通络颗粒可降低神经功能缺损评分,促进局部脑血流量的回升,减少梗死体积,改善海马区组织形态学异常、钙离子超载现象,对I/R大鼠有明显的保护作用。2.益气通络颗粒可显著降低I/R大鼠纹状体细胞外液中Glu、GABA水平,并降低海马区域中p-ERK/ERK、p-CAMKⅡ、NR2B蛋白的表达水平,从而发挥对脑缺血再灌注损伤的保护作用。