结冷胶的生产菌种选育及发酵工艺的研究

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结冷胶是目前国际上集增稠、悬浮、乳化、稳定于一体,性能优越的食品胶之一,具有极高的商业利润和市场前景。结冷胶是用生物发酵方法得到的多糖胶质凝胶剂,有着用量低、透明度高、香气释放能力强、耐酸、耐碱等优点,在食品行业、医药行业、日化用品行业和造纸行业内有着广泛的用途。本论文在实验室规模上以伊乐假单胞杆菌(Pseudomonas elodea)作为出发菌株,以结冷胶的产量和凝胶强度为参考指标,对该菌进行了低能氮离子注入诱变,获得了一株高产结冷胶的突变菌株A3-5,并优化了其发酵条件和培养基组成,改进后提取工艺。主要研究结论如下:(1)采用低能氮离子束对Pseudomonas elodea进行注入诱变,确定了合适的诱变条件:低能氮离子照射(10 KeV,距离30 cm,靶室抽真空至10-3 Pa)200 s,以氨苄青霉素作为抗性筛子,在此条件下得到正突变株5株,其中突变株A3-5的结冷胶产量较出发菌株提高了25%,凝胶强度为950 g/cm2。并且该菌较出发菌生长速度快,其粘度和分子量均有所提高。突变菌株经传代培养,结冷胶产量未出现较大的变化,遗传稳定性较好。(2)对细菌Pseudomonas elodeaA3-5发酵产结冷胶的工艺条件和发酵培养基成分进行了研究。最优碳氮源种类及浓度:碳源为30 g/L的蔗糖,氮源为2 g/L的复合氮源(豆饼粉1 g/L,NaNO3 1 g/L)。确定了最佳装液量为120 ml/500 ml摇瓶,接种量为12%, pH为7.5。产胶量和凝胶强度比优化前提高了4.2%和13.7%。(3)研究了结冷胶后提取工艺,并对脱乙酰基过程和除蛋白过程进行了优化。确定了最佳脱已酰处理的工艺条件。在该处理条件下的凝胶强度达到1280 g/cm2。考察了两种除蛋白的方式:酶法和过滤的方法,通过对蛋白质的去除率、结冷胶回收率的比较发现,过滤的方法最好。结冷胶回收率为96.2%,蛋白质去除率为86.2%。
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