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研究背景:子宫内膜异位症,简称内异症,是妇产科的一种多发病、常见病,近年来发病率呈明显上升趋势,可达10%-15%[1],占普通妇科手术的30%以上。内异症所引起的痛经、下腹痛和不孕等,严重地影响妇女的健康和生活质量,也是不育症的主要病因之一[2]。目前诊断主要以微创的腹腔镜检查为金标准,但缺乏特异性的生化指标;治疗方法主要采用手术和激素治疗,这些方法虽对减轻症状,促进妊娠有一定帮助,但效果有限,副作用明显,且易复发,无法根治。影响内异症临床治疗效果的主要原因是本病的发病机制不清楚。目前广泛接受的是sampson提出的经血逆流子宫内膜种植学说,但内膜种植及其侵袭、转移是多因素参与的复杂过程。逆流的内膜碎片经过粘附、侵袭及血管生成的过程,才能继续存活,形成内异症。期间涉及多种细胞因子、酶、生长因子等,并涉及遗传、内分泌障碍,免疫功能异常。核转录因子Kappa B (NF-κB)是一种重要的核转录因子,它存在于多种细胞,并参与炎症、免疫、细胞凋亡和抗凋亡及胚胎发育等多种生理、病理过程的基因调控。近年来已发现与多种肿瘤的发生、发展、疾病分期及预后均有一定的相关性,但NF-κB在内异症中的作用研究甚少。内异症的发生与异位内膜在异位粘附、种植、血管形成等过程有关,并涉及众多炎症性细胞因子、生长因子等,而NF-κB的异常激活可上调与这些过程有关的细胞因子。巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration inhibitory factor,MIF)是一种细胞因子,具有多种生物学功能。最近有研究提示MIF可能在与内异症相关的血管生成中起作用[3],近年来对其在内异症发病中作用的研究已日益重视。研究表明,MIF是NF-κB的下游基因,是受到NF-κB调控的基因[4]。但是,NF-κB对MIF的调控在内异症发病机制中是否起作用尚不清楚。第一部分NF-кB、MIF在子宫内膜异位症的表达及其相关性研究目的:检测NF-κB、MIF在内异症患者在位内膜、异位内膜和正常(对照组)子宫内膜中的表达情况,探讨上述因子与内异症发病的关系,以及它们在内异症表达中的相关性。方法:采用免疫组织化学SABC法分别检测NF-κB、MIF在30例对照组子宫内膜、35例内异症患者的在位内膜及60例内异症患者的异位内膜中的表达,全部数据用SPSS10.0统计软件处理。结果:⑴NF-κB、MIF主要表达于三组内膜的腺上皮细胞,在异位内膜的间质及血管内皮细胞中亦有表达。对照组子宫内膜表达最弱,而在异位内膜的表达最强(p<0.001);⑵在位及正常子宫内膜的NF-κB、MIF表达不随月经周期的改变而改变,在位及正常子宫内膜在增生期与分泌期相比,差异无统计学意义(P>0.05);⑶NF-κB、MIF的表达与内异症的临床分期存在一定的相关性,在异位内膜组织中II期的表达最强,II期和III期的表达与I期、IV期相比,差异有显著统计学意义(P<0.05);⑷NF-κB与MIF在三组内膜中的表达具有相关性,相关系数分别是0.875、0.882、0.927。结论:⑴NF-κB、MIF在子宫内膜异位症患者的在位及异位的内膜中有异常高表达,而在正常子宫内膜组织中微弱表达;⑵NF-κB、MIF的表达无月经周期性改变且主要在内异症的早、中期参与作用;⑶NF-κB与MIF的表达成正相关,说明NF-κB可能通过上调MIF的表达而在子宫内膜异位症发病机制中起重要作用。第二部分子宫内膜异位症基质细胞中MIF的表达可能与NF-κB有关目的:检测NF-κB、MIF在经TNF-α、PDTC+ TNF-α处理过的培养的子宫内膜异位症基质细胞上清液中的表达情况,探讨NF-κB、MIF与内异症发病的关系,以及它们在内异症中表达的相关性。方法:原代培养子宫内膜异位症基质细胞,分别给予TNF-α、PDTC+ TNF-α干预刺激,通过ELISA法检测子宫内膜异位症基质细胞上清液中的NF-κB、MIF的浓度。全部数据用SPSS10.0统计软件处理。结果:⑴NF-κB、MIF在经TNF-α、PDTC+ TNF-α处理过的培养的子宫内膜异位症基质细胞上清液中有表达;⑵TNF-α的刺激可使子宫内膜异位症基质细胞上清液中的NF-κB、MIF蛋白表达呈剂量和时间依赖性增高,而PDTC(NF-κB的抑制剂)可抑制此作用;⑶子宫内膜异位症基质细胞上清液中的NF-κB、MIF蛋白表达具有相关性,相关系数为0.947。结论:⑴NF-κB、MIF在经TNF-α、PDTC+ TNF-α处理过的培养的子宫内膜异位症基质细胞上清液中有表达;⑵TNF-α可上调子宫内膜异位症基质细胞上清液中NF-κB和MIF蛋白的表达,而PDTC可抑制此作用;⑶经TNF-α、PDTC+ TNF-α处理过的培养的子宫内膜异位症基质细胞上清液中NF-κB、MIF蛋白的表达具有相关性,说明MIF蛋白表达可能与NF-κB途径有关,从而在EMs的发病机制中起着重要的作用。